厄贝沙坦对自发性高血压大鼠肥厚左室心肌组织microRNA表达谱的影响

摘要

目的:通过分析使用不同剂量厄贝沙坦(Irbesartan，Irb)干预后自发性高血压大鼠(SHR)肥厚左室心肌组织中microRNA(miRNA)表达谱的变化，筛选出用药前后差异表达的miRNA，分析其中可能起作用的miRNA及其作用靶基因，以探讨高血压心肌肥厚发生的新机制以及厄贝沙坦改善心肌肥厚的相关分子机制，为临床从miRNA水平防治高血压左心室心肌重构提供初步的实验依据。　　方法:选取SPF级雄性10周龄SHR大鼠24只，随机分为4组，每组6只:空白对照组（SHR组）、Irb50组（厄贝沙坦50mg/kg/d）、Irb100组（厄贝沙坦100mg/kg/d）、Irb200组（厄贝沙坦200mg/kg/d）。同时选取SPF级雄性10周龄Wistar-Kyoto(WKY)大鼠6只作为正常对照组。药物干预组每天给药一次共给药16周，同时SHR组和WKY组喂以等量蒸馏水作为对照。所有大鼠喂养16周后，以血压变化情况、左心室质量指数(LVMI)、心肌病理组织学染色、测量心肌细胞横径(TDM)和胶原容积分数(CVF)方法来观察厄贝沙坦治疗效果。同时提取左心室心肌组织总RNA，采用miRNA芯片检测药物干预后心肌组织miRNA表达谱的差异。　　结果:在厄贝沙坦干预SHR大鼠肥厚左心室心肌组织中miRNA差异表达的研究结果显示:1.与SHR组相比，药物干预组大鼠的收缩压和舒张压随着厄贝沙坦处理剂量的升高明显降低(P＜0.01)。2.HE染色结果显示，与正常对照组相比，SHR组大鼠左心室心肌细胞呈肥大表现，且心肌间质和胶原纤维有不同程度的增多，不同剂量厄贝沙坦干预后，SHR大鼠LVMI，TDM和CVF均有不同程度的降低(P＜0.05)，其中Irb200干预组SHR大鼠的LVMI，TDM和CVF显著低于Irb50和Irb100干预组。3.与正常对照组相比，SHR组大鼠左心室心肌组织miRNA表达谱中差异表达的miRNA共有228个，其中159个miRNA表达显著上调，69个miRNA显著下调。不同剂量厄贝沙坦干预后，Irb50干预组和SHR组相比，53个miRNA显著上调，18个miRNA显著下调;Irb100干预组和SHR组相比，20个miRNA显著上调，19个miRNA显著下调;Irb200干预组和SHR组相比，19个miRNA显著上调，56个miRNA显著下调。4.SHR组较之正常对照组相比差异表达的miRNA中表达上调10倍以上的有4个，分别为:miR-122-5p，miR-184，miR-30c-1-3p和miR-504。下调十倍以上的有4个，分别为:miR-92b-5p，miR-702-5p，miR-3557-3p和miR-466b-5p，其中miR-122-5p上调达到200多倍。厄贝沙坦干预后，Irb50组较之SHR组差异表达的miRNA表达上调10倍以上的有4个，分别为:miR-204-5p，miR-204-3p，miR-487b-3p和miR-382-5p。下调10倍以下的没有。Irb200组较之SHR组差异表达的miRNA表达上调10倍以上的有2个，分别为:miR-138-1-3p和miR-382-5p。下调10倍以下的有8个，分别为:miR-547-5p，miR-872-3p，miR-344g，miR-29b-3p, miR-187-3p, miR-1843-3p, miR-326-3p和miR-122-5p。其中miR-122-5p的下调最为明显，提示miR-122-5p很可能是厄贝沙坦改善高血压左心室心肌重构的关键miRNA。　　结论:本实验研究结果表明厄贝沙坦呈剂量依赖性改善心肌肥厚及心肌纤维化。SHR大鼠肥厚左室心肌组织中miRNA表达谱发生明显改变提示miRNA参与了心肌重构。经过厄贝沙坦干预后，SHR大鼠肥厚左心室心肌组织miRNA的表达谱发生明显改变，提示厄贝沙坦很可能是通过调控miRNA的表达逆转或延缓心肌重构，miR-122-5p有可能是厄贝沙坦干预的关键miRNA。本研究有助于启示临床从miRNA水平诊断和治疗高血压左心室肥厚。

目录

摘要

前言

材料与方法

1 实验材料与仪器

2 主要实验试剂

3 主要实验仪器

4 实验方法

结果

1 大鼠血压和 左心室肥厚指标比较

2 大鼠左心室心肌的组织病理学监测

3 总RNA的质量及纯度检测结果

4 miRNA在各组大鼠左心室心肌组织中的差异表达

讨论

1．心肌肥厚发生过程中microRNA的调控作用

2．厄贝沙坦对高血压左心室肥厚心肌组织中miRNA表达谱的影响

结论

参考文献

英汉缩略词对照表

致谢

综述

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