甜菜夜蛾与小白菜硫苷的相互影响及Bra008132基因的初步功能研究

摘要

硫代葡萄糖苷是十字花科植物中一种典型的防御代谢产物。黑油筒小白菜对害虫取食表现出高抗性，为了研究其抗虫机理，本实验检测了黑油筒叶片不同生长时期和不同叶位的硫苷含量，讨论了小白菜中硫苷分布的生理和生态意义；利用甜菜夜蛾与黑油筒小白菜含有的硫苷之间的相互作用，探究了黑油筒的抗虫机理，并对响应甜菜夜蛾取食变化剧烈的Bra008132基因，进行了基因及其启动子分析以及相关载体的构建。主要研究结果如下：　　（1）黑油筒小白菜不同叶期叶片中的硫苷含量变化较大，由四叶期到八叶期硫苷含量增加，十二叶期硫苷含量下降。其中，脂肪族硫苷含量随着叶期的生长呈现下降趋势，在十二叶期时硫苷含量达到最低。吲哚族和芳香族硫苷含量的变化趋势与总硫苷的变化趋势一致，皆在八叶期时硫苷含量最高，四叶期和十二叶期含量较低。对八叶期不同叶位中硫苷含量的检测发现，幼叶相对于老叶，硫苷含量较高。　　（2）对甜菜夜蛾取食后黑油筒小白菜中的硫苷含量变化检测发现，随着取食时间的延长硫苷含量呈上升的趋势，且吲哚族硫苷比脂肪族硫苷的上升趋势更为明显。对甜菜夜蛾体内谷胱甘肽转移酶活性的检测发现，其活性随取食时间的延长显著提高。对硫苷相关基因的定量分析，包括BrBCAT4-1、BrMAM1-1、BrSUR1-1、BrMYB28-1、BrAOP2-1、BrSOT16-1、BrCYP83A1-1、BrCYP83B1和BrAPK2-1，发现甜菜夜蛾会引起硫苷相关基因的表达上调，不同基因的变化趋势不一致。　　（3）从黑油筒小白菜基因组中克隆Bra008132基因的全长序列，发现该基因包含一个完整的开放阅读框，编码339个氨基酸。对该基因进行软件预测发现其编码的蛋白没有信号肽、无跨膜结构、亚细胞定位在细胞质中。对Bra008132基因的启动子序列进行分析，发现该启动子富含TATA-Box和CAAT-Box等基本元件，以及光响应、脱落酸、生长素、防御胁迫等顺式作用元件。qRT-PCR结果表明，Bra008132基因在不同时期的表达量有差异。

目录

缩略词

1文献综述

1.1 硫代葡萄糖苷

1.2 SOT蛋白研究进展

1.3 甜菜夜蛾的分布及其危害

1.4本研究的目的与意义

2 黑油筒不同叶期以及不同叶位硫苷含量

2.1 材料与方法

2.2 结果

2.3 讨论

3 甜菜夜蛾与黑油筒硫苷的相互影响

3.1 材料与方法

3.2 结果

3.3 讨论

4小白菜基因Bra008132的克隆与表达分析

4.1 材料与方法

4.2 结果

4.3 讨论

全文结论

附表

参考文献

致谢