声明
摘要
第一篇 可变剪切因子hnRNP-L的结构及与RNA结合特性的研究
第1章 综述
1．1 前体mRNA的剪切
1．2 可变剪切概述
1．3 HnRNP L蛋白研究现状
第2章 实验材料与方法
2．1 质粒构建，蛋白表达和纯化
2．2 HnRNP-L各部分蛋白的表达和纯化
2．3 HnRNP L RRM1和RRM34的晶体生长和衍射数据收集
2．4 模型构建和结构修正
2．5 凝胶迁移阻滞实验(EMSA)
2．6 表面等离子共振实验(SPR)
2．7 稳态FRET实验
2．8 等温滴定微量热实验(ITC)
2．9 Cross-link实验
2．10 动态光散射实验(DLS)
第3章 实验结果与讨论
3．1 HnRNP L各部分结合RNA的能力
3．2 HnRNP L RRM1和hnRNP L RRM34的结构解析
3．3 HnRNP L RRM1的结构
3．4 HnRNP L RRMN1的RNA结合面
3．5 HnRNP L RRM34的结构
3．6 HnRNP L RRM34和PTB RRM34的结构
3．7 HnRNP L RRM34的RNA结合面
3．8 HnRNP L RRM34诱导RNA成环
3．9 讨论
本篇小结
参考文献
第二篇 组蛋白伴侣SSRP1的结构与功能研究
第1章 转录延伸因子及组蛋白伴侣FACT复合物的研究进展
1．1 转录延伸因子概述
1．2 组蛋白伴侣FACT的研究进展
第2章 实验材料和方法
2．1 基因的克隆、质粒构建和蛋白表达
2．2 SSRP1蛋白的纯化
2．3 SSRP1-M蛋白的晶体生长和衍射数据收集
2．4 模型构建和结构修正
2．5 凝胶迁移阻滞实验(EMSA)
2．6 荧光偏振实验(FPA)
2．7 圆二色谱(CD)实验
2．8 SSRP1蛋白与组蛋白的结合实验
第3章 实验结果与讨论
3．1 SSRP1蛋白的表达、纯化与晶体生长
3．2 SSRP1-M蛋白的结构解析
3．3 SSRP1-M蛋白的整体结构
3．4 SSRP1-M蛋白与Pob3-M和Rtt106-M的结构比较
3．5 SSRP1-M与DNA的相互作用
3．7 SSRP1-M与组蛋白的结合实验
3．8 讨论
3．9 展望
本篇小结
参考文献
致谢
在读期间发表的学术论文与取得的研究成果
