自噬相关蛋白LC3和Beclin1在肝纤维化大鼠中的表达及蓝莓的作用

摘要

目的：　　观察微管相关蛋白轻链3(microtubule-associated protein l light chain3,LC3)和Beclin1在免疫性肝纤维化大鼠肝组织中的表达以及蓝莓对其作用。　　方法:　　60只健康雄性SD大鼠随机分为正常对照组、模型组、蓝莓原浆高剂量组、蓝莓原浆中剂量组、蓝莓原浆低剂量组及复方鳖甲软肝片组。除正常对照组以外，其余各组大鼠于每周二、周五予无菌猪血清腹腔注射复制大鼠免疫性肝纤维化模型。造模同时各蓝莓组分别给予不同浓度蓝莓原浆(1.0ml/100g、0.5ml/100g、0.25ml/100g)灌胃，复方鳖甲软肝片组予复方鳖甲软肝片灌胃(0.054g/100g)，1次/天，共12周。12周末处死大鼠，测定血清ALT、AST、ROS的含量，行肝组织病理学检查（HE和Masson染色）；采用免疫组织化学法、Western blot法检测肝组织LC3-Ⅱ、Beclin1的蛋白水平；Western blot法检测肝组织Ⅰ型胶原(ColⅠ)的蛋白水平；RT-PCR法检测肝组织LC3-Ⅱ、Beclin1的mRNA水平。　　结果：　　各组大鼠血清 ALT、AST水平差异无统计学意义(F=9.134和3.497，均P>0.05)。与正常对照组比较，模型组大鼠出现明显肝纤维化(Hc=43.952，P<0.05)，血清ROS水平显著升高(F=985.510，P<0.01)，肝组织LC3-Ⅱ、Beclin1的mRNA及蛋白表达、ColⅠ的蛋白表达明显增高(F=121.430，117.756，43.710，54.005，49.530，均 P<0.01)。与模型组比较，蓝莓原浆高、中剂量组肝纤维化程度明显减轻(Hc=43.952，P<0.05)，胶原表达减少；血清ROS水平明显下降(F=985.510，P<0.01)，肝组织LC3-Ⅱ、Beclin1的mRNA、蛋白表达及ColⅠ的蛋白表达明显降低(F=121.430，117.756，43.710，54.005，49.530，均P<0.01)。　　结论：　　1.在猪血清所致大鼠免疫性肝纤维化中血清 ROS含量增加，肝组织LC3-Ⅱ、Beclin1基因及蛋白水平升高，提示自噬可能促进了免疫性肝纤维化的发生；　　2.蓝莓对大鼠免疫性肝纤维化的干预作用可能与降低血清ROS水平，下调肝组织LC3和Beclin1的基因及蛋白表达，进而抑制自噬有关。

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英文缩略词表

0 引 言

1 材料与方法

1.1 材料

1.2 方法

2 结 果

2.1 肝组织病理学改变

2.2各组大鼠血清ALT、AST比较

2.3 各组大鼠血清ROS水平

2.4 各组大鼠肝组织LC3-Ⅱ、Beclin1的蛋白表达（免疫组化）

2.5 各组大鼠肝组织LC3-Ⅱ、Beclin1、ColⅠ的蛋白表达（Western blot）

2.6 各组大鼠肝组织LC3-Ⅱ、Beclin1的mRNA表达

3 讨论

4 结论

参考文献

综述：细胞自噬与肝纤维化

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致谢

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