切口痛大鼠脊髓胶质细胞ERK1/2与丙戊茶碱镇痛机制研究

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第一章 前言

第二章 背景回顾

2.1 痛觉信号的传导

2.2 胶质细胞与病理性疼痛

2.2.1 星形胶质细胞与病理性疼痛

2.2.2 小胶质细胞与病理性疼痛

2.2.3 胶质细胞与急性疼痛

2.3 ERK1/2与疼痛敏化

2.3.1 ERK1/2与疼痛的外周敏化

2.3.2 ERK1/2与疼痛的中枢敏化

2.4 PPF与急性疼痛

第三章 材料与方法

3.1 实验动物及分组

3.1.1 实验动物

3.1.2 实验分组

3.2 实验试剂及制备方法

3.3 实验耗材和仪器

3.4 大鼠鞘内注射

3.5 大鼠切口痛研究模型

3.6 疼痛行为学测定方法

3.6.1 机械痛阈测定

3.6.2 热痛阈测定

3.7 脊髓标本的取材与保存

3.7.1 Western Blot标本的取材

3.7.2 免疫荧光染色标本的取材

3.8 Western Blot定量检测蛋白质含量

3.9 免疫荧光染色法及双染法

3.10 数据收集及统计分析

第四章 实验结果

4.1 疼痛行为学测定结果

4.1.1 机械痛阈测定结果

4.1.2 热痛阈测定结果

4.2 Western Blot蛋白定量检测结果

4.2.1 趾部切口后大鼠脊髓神经元、胶质细胞标记物的表达

4.2.2 鞘内注射PPF后脊髓神经元、胶质细胞标记物的表达

4.2.3 鞘内注射U0126后脊髓神经元、胶质细胞标记物的表达

4.2.4 鞘内注射PPF后脊髓ERK1/2的磷酸化

4.2.5 鞘内注射U0126后脊髓ERK1/2的磷酸化

4.3 免疫荧光染色及双染观察结果

4.3.1 趾部切口后大鼠脊髓神经元的活化

4.3.2 鞘内注射PPF或U0126后脊髓神经元、胶质细胞的活化

4.3.3 鞘内注射PPF或U0126后脊髓ERK1/2的磷酸化

4.3.4 鞘内注射PPF或U0126后脊髓TNF-α和COX-2的表达

4.3.5 p-ERK1/2在脊髓表达的细胞定位

第五章 讨论

5.1 疼痛行为学

5.2 Western Blot及免疫荧光染色

5.3 免疫荧光共染

第六章 结论

创新性

局限性与展望

参考文献

综述:细胞外信号调节激酶1/2诱导痛觉过敏机制的研究进展

附录

附录1 缩略词对照表

附录2 技术路线图

附录3 行为学测量von Frey纤维丝阳性/阴性对应κ值表

在学期间的研究成果

致谢