micro-RNA143及P53、K-ras在结肠腺瘤性息肉及结肠癌中的表达及其临床意义

摘要

目的:对结肠癌、结肠腺瘤性息肉以及正常结肠粘膜组织中的miR-143及P53、K-ras进行检测，以明确其与结肠腺瘤性息肉以及结肠癌发生发展的关系，为结肠癌发病机制及早期发现提供理论依据。　　方法:收集结肠癌、结肠腺瘤及正常结肠组织临床新鲜组织标本各9例，应用免疫组织化学方法检测P53蛋白、K-ras蛋白在结肠组织中的表达情况，应用Western-blot检测P53蛋白、K-ras蛋白的表达情况，应用RT-PCR方法检测miR-143的表达情况　　结果:(1)免疫组织化学检测结果显示，P53蛋白在正常结肠组、结肠腺瘤组及结肠癌组的阳性表达率逐渐增加，分别为0％(0/9)，22.2％(2/9)，100％(9/9);其中正常结肠组与结肠腺瘤组的阳性表达率，差别无统计学意义(P＞0.05)，而结肠癌组与正常结肠组、结肠癌组与结肠腺瘤组的阳性表达率，差别有统计学意义(P＜0.05)。K-ras蛋白在正常结肠组、结肠腺瘤组和结肠癌组的阳性表达率逐渐增加，分别为11.1％(1/9)，66.7％(6/9)，100％(9/9)。其中结肠癌组和结肠腺瘤组阳性表达率，差别无统计学意义(P＞0.05)，而正常结肠组与结肠腺瘤组、正常结肠组与结肠癌组的阳性表达率，差别有统计学意义(P＜0.05);(2) Western-blot法检测结果显示，P53蛋白在正常结肠组、结肠腺瘤组及结肠癌组的表达量逐渐增加，其值分别为0.223±0.053，0.298±0.010，0.785±0.166;三组组织中P53蛋白的表达差别有统计学意义(F=62.195，P＜0.05);两两比较，P53蛋白在结肠腺瘤组的表达(0.298±0.010)较正常结肠组的表达(0.223±0.053)增加，差别无统计学意义(P＞0.05);P53蛋白在结肠癌组(0.785±0.16)的表达较结肠腺瘤组的表达(0.298±0.010)增加，差别有统计学意义(P＜0.01);P53蛋白在结肠癌组(0.785±0.16)的表达较正常结肠组的表达(0.223±0.053)增加，差别有统计学意义(P＜0.01)。K-ras蛋白在正常结肠组、结肠腺瘤组及结肠癌组的表达量逐渐增加，其值分别为0.311±0.092，0.591±0.188，0.735±0.105;三组组织中K-ras蛋白的表达差别有统计学意义(F=22.732，P＜0.05);两两比较，K-ras蛋白在结肠癌组的表达(0.735±0.105)较结肠腺瘤组(0.591±0.188)的表达增加，差别有统计学意义(P＜0.05)，K-ras蛋白在结肠癌组的表达(0.735±0.105)较正常结肠组(0.311±0.092)的表达增加，差别有统计学意义(P＜0.01)，K-ras蛋白在结肠腺瘤组的表达(0.591±0.188)较正常结肠组(0.311±0.092)的表达增加，差别有统计学意义(P＜0.01)。(3) RT-PCR方法检测结果显示，miR-143在正常结肠组、结肠腺瘤组及结肠癌组的表达量分别为:0.935±0.342，0.144±0.103，0.222±0.134;三组组织中miR-143的表达差别有统计学意义(F=35.227，P＜0.05);两两比较，miR-143在结肠腺瘤组(0.144±0.103)的表达较结肠癌组的表达(0.222±0.134)减少，差别无统计学意义(P＞0.05)，miR-143在结肠腺瘤组(0.144±0.103)的表达较正常结肠组(0.935±0.342)减少，差别有统计学意义(P＜0.01)，miR-143在结肠腺癌组(0.222±0.134)的表达较正常结肠组(0.935±0.342)减少，差别有统计学意义(P＜0.01)。(4)运用Spearman检验分析了miR-143和P53蛋白、K-ras蛋白表达的相关性。结果显示:miR-143和P53蛋白的表达无明显相关性(P＞0.05);而miR-143和K-ras蛋白的表达存在负相关(P＜0.01)，Spearman相关系数(r)分别为:-0.371，-0.792。　　结论:1.P53的过量表达可能与结肠癌的发生发展有关，而与结肠腺瘤关系不明显。2.kras的过量表达可能与结肠腺瘤及结肠癌的发生发展有关。3.miR-143的低水平表达可能与结肠腺瘤及结肠癌的发生发展有关。4.miR-143和P53不存在相关性，P53可能不参与或者并不直接参与miR-143的调控;miR-143和K-ras存在负相关，推测miR-143可能通过抑制k-ras基因的表达来抑制结肠腺瘤及结肠癌的发生与发展.

目录

摘要

前言

材料与方法

1 实验材料与仪器

2 主要实验试剂

3 主要的实验仪器

4 实验方法

5．统计学处理

结果

1 免疫组化检测P53、K-ras蛋白的表达

2．Western blotting检测P53蛋白、K-ras蛋白的表达

3．实时荧光定量PCR分析结果

4．miR-143与P53蛋白、K-ras蛋白的相关性

附图

讨论

1．P53与结肠腺瘤、结肠癌

2．K-ras与结肠腺瘤、结肠癌

3．miR-143与结肠腺瘤、结肠癌

4．miR-143与P53、K-ras表达的相关性

结论

参考文献

英汉缩略词对照表

致谢

综述

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