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摘要
缩略词简表
1．1微生物代谢工程
1．1．1微生物代谢工程中常用调控方式
1．2微生物代谢工程中的动态调控
1．2．2依赖于外部条件改变的动态调控
1．2．3依赖于特定代谢物的动态调控
1．2．4依赖于群体密度的动态调控
1．3微生物中的群体感应现象及其在代谢途径动态调控中的应用
1．3．1群体感应现象简介
1．3．2群体感应相关基因调控回路的设计与开发
1．3．3群体感应系统在代谢调控中的应用
1．4本论文的研究内容及意义
2．1培养基
2．2研究中所用主要仪器
2．3实验试剂
2．4微生物相关实验操作
2．4．1菌体培养
2．4．2实验室菌种保藏
2．5分子生物学实验技术
2．5．1基因与引物合成
2．5．2PCR技术
2．5．3琼脂糖凝胶电泳与DNA纯化回收
2．5．4酶切反应
2．5．5重组质粒的构建方法
2．5．6大肠杆菌转化
2．5．7菌落PCR验证阳性转化子
2．5．8大肠杆菌质粒提取
2．5．9酵母转化(LiAc法)
2．5．10基因组整合
2．5．11酵母质粒提取
2．5．12酵母染色体提取
2．6实验菌株性能检测与产物的发酵检测
2．6．1荧光检测
2．6．2摇瓶发酵
2．6．3发酵罐发酵
2．6．4 α-法尼烯检测
2．6．5香叶醇检测
第三章细胞分裂素介导的群体感应系统的构建与优化
3．1前言
3．2质粒、菌株和引物
3．2．1质粒
3．2．2菌株
3．2．3引物
3．3质粒、菌株的构建及本章所用实验方法
3．3．1本章所用质粒、菌株的构建
3．3．2本章所用实验方法
3．4结果与分析
3．4．1细胞分裂素介导的群体感应系统的初步构建
3．4．2优化信号响应途径中受磷酸化Skn7激活的启动子提高群体感应系统性能
3．4．3提高信号分子响应途径中关键组分Ypd1以及Skn7的调控水平优化系统性能
3．5本章小结
第四章群体密度调控的蛋白降解系统的设计及构建
4．1前言
4．2质粒、菌株和引物
4．2．1质粒
4．2．2菌株
4．2．3引物
4．3质粒、菌株的构建及本章所用实验方法
4．3．1本章所用质粒、菌株的构建
4．3．2本章所用实验方法
4．4结果与分析
4．4．1酿酒酵母中植物生长素吲哚乙酸介导的蛋白降解系统(AID system)的构建
4．4．2吲哚乙酸介导的蛋白降解系统中影响蛋白降解速率的关键组分
4．4．3群体密度调控的动态蛋白降解系统的构建
4．5本章小结
第五章利用群体密度调控的蛋白降解策略动态调控代谢途径提高目标产物产量
5．1前言
5．2质粒、菌株和引物
5．2．1质粒
5．2．2菌株
5．2．3引物
5．3本章所用质粒、菌株的构建
5．4结果与分析
5．4．1利用受群体密度调控的蛋白降解系统动态控制Er99降解以提高α-法尼烯产量
5．4．2利用受群体密度调控的蛋白降解系统动态控制Er920降解以提高香叶醇产量，缓解细胞生长受损现象
5．5本章小结
6．1全文总结
6．2展望
附录
参考文献
攻读学位期间发表的学术论文
致谢
山东大学;
