细菌来源的硫醇甲基转移酶MddA的酶学性质及催化机制研究

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缩略词表

摘要

1．1研究背景

1．1．1硫循环

1．1．2环境中的二甲基硫

1．1．3环境中的硫化氢和甲硫醇

1．1．4硫醇甲基转移酶

1．2立题依据与研究内容

1．2．1立题依据

1．2．2研究内容

第二章MddA的序列分析及表达纯化与酶学性质分析

2．1引言

2．2．1实验菌株与质粒

2．2．2主要药品、试剂与试剂盒

2．2．3培养基与缓冲液

2．2．4主要仪器设备

2．2．5数据库及分析软件

2．3实验方法

2．3．1表达载体的构建

2．3．2MddA的异源表达与纯化

2．3．3MddA酶活的高效液相色谱检测

2．3．4MddA酶活的气相色谱检测

2．4结果与分析

2．4．1MddA的蛋白序列分析

2．4．2MddA的异源表达与纯化

2．4．3MddA的基本酶学性质

2．4．4MddA对于硫化氢的酶活测定

2．4．5MddA催化反应的动力学参数

2．5讨论

3．1引言

3．2实验材料

3．2．1实验菌株与质粒

3．2．2主要药品、试剂与试剂盒

3．2．3培养基与缓冲液

3．3．1蛋白的结晶

3．3．2突变体的构建

3．3．3蛋白的异源表达与纯化

3．4结果与分析

3．4．1MddA的结晶

3．4．2MddA的结构预测

3．4．3MddA的关键氨基酸残基分析

3．4．4MddA催化机制分析

3．5讨论

全文总结与展望

参考文献

致谢