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摘要
第1章文献综述
1．1衰老与生殖功能
1．2影响卵母细胞衰老的因素
1．2．1氧化应激与卵母细胞衰老
1．2．2线粒体功能障碍与卵母细胞衰老
1．2．3Sirtuins家族与卵母细胞衰老
1．2．4卵丘细胞与卵母细胞衰老
1．3褪黑素的研究进展
1．3．1褪黑素简介
1．3．2褪黑素的合成与代谢
1．3．3褪黑素受体
1．3．4褪黑素的抗氧化作用
1．3．5褪黑素在动物生殖过程中的作用
1．3．6本研究的目的与意义
第2章褪黑素对高龄小鼠卵母细胞体外成熟及胚胎发育的影响
2．1引言
2．2试验材料
2．2．1试验动物的饲养
2．2．2试验仪器
2．2．3试验耗材
2．2．4试验试剂
2．3试验方法
2．3．1主要试验试剂的配制
2．3．2高龄小鼠卵母细胞的收集和体外成熟
2．3．3高龄小鼠卵母细胞的体外受精和胚胎发育
2．3．4数据统计与分析
2．4试验结果
2．4．1褪黑素对高龄小鼠卵母细胞体外成熟的影响
2．4．2褪黑素对高龄小鼠卵母细胞体外受精的影响
2．4．3褪黑素对高龄小鼠卵母细胞早期胚胎体外发育的影响
2．5讨论
2．6小结
第3章褪黑素改善高龄小鼠卵母细胞体外成熟的作用机制
3．1引言
3．2试验材料
3．2．1试验动物的饲养
3．2．2试验仪器
3．2．3试验试剂及耗材
3．3试验方法
3．3．1主要试验试剂的配制
3．3．2高龄小鼠卵母细胞的收集和体外成熟培养
3．3．3活性氧(ROS)含量检测
3．3．4总谷胱甘肽含量的检测
3．3．5线粒体活性检测
3．3．6ATP含量的检测
3．3．7Annexin V-FITC凋亡检测
3．3．8免疫荧光染色
3．3．9数据统计与分析
3．4试验结果
3．4．1褪黑素对高龄小鼠卵母细胞内ROS水平的影响
3．4．2褪黑素对高龄小鼠卵母细胞内总谷胱甘肽含量的影响
3．4．3褪黑素对高龄小鼠卵母细胞线粒体分布的影响
3．4．4褪黑素对高龄小鼠卵母细胞内ATP含量的影响
3．4．5褪黑素对高龄小鼠卵母细胞的早期凋亡的影响
3．4．6褪黑素对高龄小鼠卵母细胞纺锤体形态的影响
3．5讨论
3．6小结
第4章褪黑素对高龄小鼠卵母细胞抗氧化和抗衰老相关基因的影响
4．1引言
4．2试验材料
4．2．1试验动物的饲养
4．2．2试验仪器
4．2．3试验试剂及耗材
4．3试验方法
4．3．1高龄小鼠卵母细胞的收集和体外培养
4．3．2定量引物的设计
4．3．3小鼠组织DNA的提取
4．3．4引物验证
4．3．5微量反转录
4．3．6RT-qPCR检测
4．3．7数据分析
4．4试验结果
4．4．1抗氧化和抗衰老基因的PCR扩增与检测
4．4．2褪黑素对卵母细胞抗氧化和抗衰老相关基因的影响
4．5讨论
4．6小结
全文结论
参考文献
攻读学位期间取得的研究成果
致谢
扬州大学;
