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前 言
第一章 绪论
1.1端粒和端粒酶
1.1.1 端粒的结构和功能
1.1.2 端粒酶的结构和功能
1.1.3 端粒酶活性与细胞衰老和癌症发生的关系
1.1.4 端粒酶的检测方法
1.2 MicroRNA
1.2.1 MicroRNA简介
1.2.2 miRNA的检测方法
1.3 生物分子信号放大检测技术
1.3.1 基于滚环扩增（RCA）的信号放大检测技术
1.3.2 基于脱氧核酶催化的信号放大检测技术
1.3.3 基于纳米粒子与链置换反应相结合的信号放大检测技术
1.3.4 基于杂交链式反应的无酶扩增信号放大检测技术
1.4 本论文拟开展的工作
第二章 基于无酶非线性杂交链反应的具有低背景信号的多重G-四联体无标记荧光DNA树状大分子检测miRNA
2.1 引言
2.2 实验用品
2.2.1 实验试剂
2.2.2 实验器材
2.3 实验步骤
2.3.1 高压灭菌
2.3.2 blocks-A和blocks-B 的制备
2.3.3 miRNA定量检测
2.3.4 癌细胞中miRNA-21 的测定
2.3.5 RT-RCR处理过程
2.4 实验结果与讨论
2.4.1 实验原理
2.4.2 荧光DNA树状大分子的表征和传感体系的可行性验证
2.4.3 实验参数的优化
2.4.4 miRNA的定量检测
2.4.5 传感体系的选择性分析
2.4.6 实际样品的分析
2.5 结论
第三章 基于DNAzyme介导的双循环无酶扩增的血糖仪检测方法用于端粒酶检测
3.1 引言
3.2 实验用品
3.2.1 实验试剂
3.2.2 实验器材
3.3 实验步骤
3.3.2 转化酶-H2 的制备
3.3.3 H1-DNA功能化MBs
3.3.4 细胞裂解液的制备
3.3.5 PGM生物传感器的制备及端粒酶活性检测
3.3.6 凝胶电泳
3.4 实验结果与讨论
3.4.1 实验原理
3.4.2 实验可行性验证
3.4.3 实验参数优化
3.4.4 端粒酶活性的定量检测与传感体系的选择性分析
3.4.5 不同种类细胞系中端粒酶活性的检测
3.4.6 端粒酶活性的抑制评估
3.5 结论
第四章 基于级联核酸电路的双增强磁性生物传感器用于血清中循环miRNA的定量检测
4.1 引言
4.2 实验用品
4.2.1 实验试剂
4.2.2 实验器材
4.3 实验步骤
4.3.1 高压灭菌
4.3.2 凝胶电泳
4.3.3 转化酶-DNA 缀合物的制备
4.3.4 miRNA的定量检测
4.3.5 实际样品的检测
4.3.6 qRT-PCR 实验
4.4 实验结果与讨论
4.4.1 血清中miRNA检测的实验原理
4.4.2 传感系统的可行性
4.4.3 实验条件的优化
4.4.4 miRNA-21 活性的定量检测
4.4.5 传感体系的选择性分析
4.4.6 人体血清中miRNA-21 活性的检测
4.4.7 体系与qRT-PCR 检测灵敏度比较
4.5 结论
参考文献
附 录
致 谢
攻读硕士学位期间发表的学术论文
聊城大学;
