鼻病毒诱导哮喘急性加重的相关蛋白靶标筛选

摘要

目的：筛选鼻病毒诱发哮喘急性加重的相关蛋白靶标。　　方法：使用抗体芯片技术筛选出鼻病毒感染后的哮喘患者气道上皮细胞表达变化的蛋白，经过免疫沉淀捕获这些蛋白并通过质谱分析鉴定出这些有显著改变的蛋白,为了增强实验结果的可信度,也设置了鼻病毒感染及未感染的正常人气道上皮细胞作为对照组。　　结果：鼻病毒感染的哮喘患者气道上皮细胞与未感染鼻病毒的哮喘患者气道上皮细胞组间共筛选出3种差异蛋白，乳铁蛋白和Desmoglein-1在感染组分别下调36.1倍和9.3倍、ATP5B在感染组上调了12.4倍。　　结论：ATP5B、Desmoglein-1、乳铁蛋白可能作为未来辅助诊治鼻病毒诱导哮喘急性加重的蛋白靶标。

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主要符号表

前言

技术路线

材料和方法

1 原代细胞的获得

2 HeLa 细胞及鼻病毒培养

3 鼻病毒分别感染正常人及哮喘患者气道上皮细胞

4 细胞裂解

5 全蛋白量测定

6 全蛋白质控

7 全蛋白生物素标记

8 芯片设计

9 芯片质控

10 芯片筛选

11 芯片扫描

12 数据处理方法

13 免疫沉淀及电泳：

结果

1样本处理质控

2 芯片筛选结果

讨论

结论

参考文献

综述:鼻病毒与哮喘研究的最新进展

附录

攻读学位期间的研究成果

致谢

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