声明
缩略词注释表
目 录
第一章 绪论
1.1 基质金属蛋白酶与基质金属蛋白酶26
1.1.1 基质金属蛋白酶
1.1.2 MMPs的结构
1.1.3 MMPs 的定位
1.1.4 MMPs 的功能
1.1.5 MMPs靶向药物的研究进展
1.1.6 MMPs 与凋亡
1.1.7 基质金属蛋白酶-26
1.2 内质网与内质网压力
1.2.1 内质网与内质网压力
1.2.2 内质网压力应激
1.2.3 内质网压力下的蛋白命运
1.2.4 内质网压力与凋亡
1.3 GRP78
1.3.1 GRPs和GRP78
1.3.2 GRP78的细胞保护功能
1.3.3 GRP78的转录后和翻译后水平调控
1.3.4 GRP78相互作用蛋白的研究
1.4 本论文研究策略和目的
第二章 材料与方法
2.1 仪器及试剂
2.1.1 试剂及材料
2.1.2 主要仪器仪器
2.1.3 溶液及配制
2.2 实验方法
2.2.1 细胞培养
2.2.2 免疫细胞化学
2.2.4 细胞转染
2.2.5 稳定细胞系的建立
2.2.6 亚细胞器共定位实验
2.2.7 密度梯度离心分离细胞质组分
2.2.8 蛋白表达纯化
2.2.9 GST-pull down实验
2.2.10 抗体纯化
2.2.11 亲和层析
2.2.12 细胞活力检测（MTT 法）
2.2.13 Hoechst 33342 染色
2.2.14 流式细胞术
2.2.15 MMP-26三维结构的同源模建
2.2.16 数据统计
第三章 实验结果
3.1 MMP-26的内质网定位以及内质网压力下的分泌
3.1.1 MMP-26定位于内质网
3.1.2 MMP-26在内质网压力下的定位改变
3.1.3 MMP-26在内质网压力下由内质网转移至高尔基体
3.1.4 MMP-26在内质网压力下的分泌
3.1.5 MMP-26在内质网压力下定位改变与活性无关
3.1.6 MMP-26与内质网内分子伴侣GRP78 相互作用
3.1.7 MMP-26与GRP78相互作用基序
3.1.8 计算机模拟GRP78与MMP-26的相互作用
3.1小结
3.2 MMP-26调控细胞对内质网压力的敏感性
3.2.1 MMP-26调控GRP78的蛋白水平
3.2.2 MMP-26的敲除减少了内质网压力下的细胞凋亡
3.2.3 MMP-26-GFP 增加了内质网压力下的细胞凋亡
3.2.4 MMP-26对长时间内质网压力下的IRE1α 磷酸化的影响
3.2.5 MMP-26对短时间内质网压力下的 IRE1α 磷酸化的影响
3.2.6 MMP-26catE209A-GFP和MMP-26wtE209A-GFP表达细胞对内质网压力敏感性的检测
3.2.7 MMP-26wtE209A-GFP对内质网压力下的 IRE1α磷酸化的影响
3.2小结
3.3 雌激素和黄体酮对MMP-26的调控
3.3.1 雌激素和黄体酮调控MMP-26的表达
3.3.2 雌激素和黄体酮促进MMP-26-GFP的细胞外分泌
3.3.3 雌激素和黄体酮调控A549细胞内MMP-26的表达和细胞外分泌
3.3小结
第四章 讨论
4.1 MMP-26的内质网定位以及内质网压力下的分泌
4.2 MMP-26 通过调节 GRP78 的蛋白水平影响对内质网压力的敏感性
4.3 MMP-26通过降解底物发挥促凋亡作用
4.4 雌激素和黄体酮对MMP-26的调控
第五章 结论与展望
参考文献
作者简介及在学期间所取得的科研成果
致 谢
吉林大学;
