RASSF4在骨骼肌成肌细胞分化与融合过程中的作用

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第1 章 综述

1.1 骨骼肌

1.1.1骨骼肌的基本结构及功能

1.1.2 骨骼肌的发育及损伤修复

1.2 成肌细胞分化融合及相关的基因和通路

1.3 ARF6 在成肌细胞分化及融合过程的作用

1.3.1 ARF6 的结构及其功能

1.3.2 ARF6 的上下游分子以及其在成肌细胞分化及融合中的作用

1.4 RASSF4 与ARF6 的关系

1.4.1 RASSF4 的结构及功能

1.4.2 RASSF4 与ARF6 的关系以及其对成肌细胞融合的影响

1.5 本研究的立题依据及研究内容

1.6 研究目的及意义

第2 章 材料和方法

2.1实验材料

2.1.1 细胞

2.1.2实验动物

2.1.3质粒及菌株

2.2实验试剂

2.2.1细胞培养相关试剂

2.2.2 PCR相关试剂Green Taq Mix

2.2.3 Western-blot相关试剂

2.2.4 其他相关试剂

2.3实验仪器

2.4实验方法

2.4.1细胞培养及分化

2.4.3质粒扩增及鉴定

2.4.4构建稳转细胞系

2.4.5免疫荧光观察蛋白表达

2.4.6免疫蛋白印迹（WB）检测蛋白表达水平

2.4.7免疫共沉淀

2.4.8 RT-PCR检测mRNA表达水平

2.5主要液体配制

2.6 统计分析

第3 章 实验结果

3.1 RASSF4在小鼠成肌细胞体内及体外分化与融合过程中表达升高

3.1.1 RASSF4 在出生后骨骼肌发育以及损伤后修复过程中表达升高

3.1.2 RASSF4 在小鼠成肌细胞分化与融合过程中表达升高

3.2 RASSF4促进成肌细胞的分化与融合

3.2.1 过表达RASSF4 之后成肌细胞分化与融合增强

3.2.2 敲低RASSF4 抑制成肌细胞的分化与融合

3.3 在成肌细胞中RASSF4 可以与ARF6 相互作用

3.3.1 在成肌细胞中RASSF4 可以和ARF6 相互结合

3.3.2 在成肌细胞中RASSF4 与ARF6共定位

3.4 在成肌细胞中RASSF4 可以促进ARF6 激活

3.4.1 在成肌细胞中RASSF4 对ARF6表达量没有调节作用

3.4.2 在成肌细胞中RASSF4 可以调节ARF6 的活性

第 4 章 讨论

第 5 章 结论

参考文献

作者简介

致谢