Kirrel2和KirrelA在小鼠骨骼肌成肌细胞分化融合中的作用和机制研究

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前言

英文缩略词表

第1章 文献综述

1.1 骨骼肌的基本机构和功能

1.1.1 骨骼肌的发育过程

1.1.2 骨骼肌的损伤修复过程

1.2 成肌细胞融合过程

1.3 Kirrel1对骨骼肌成肌细胞融合和分化的影响

1.4 Kirrel2对骨骼肌成肌细胞融合和分化的影响

1.5 Nephrin对骨骼肌成肌细胞融合和分化的影响

1.6 Nephrin与Kirrel之间的交联作用

1.7 本研究立题依据和研究内容

第2章 材料与方法

2.1 实验材料

2.1.1 细胞和动物

2.1.2 质粒和菌株

2.2 实验仪器

2.3 实验试剂

2.3.1 细胞培养相关试剂

2.3.2 Western Blot相关试剂

2.3.3 RNA提取及RT-PCR相关试剂

2.3.4 其他相关试剂

2.3.5 主要试剂配制方法

2.4 实验方法

2.4.1 细胞培养

2.4.2 细菌转化

2.4.3 质粒小提（ SanPrep柱式质粒DNA小量抽提试剂盒，上海 生工生物）

2.4.5 免疫荧光染色

2.4.6 流式细胞术测试细胞周期（以35 mm皿为例）

2.4.7 细胞划痕实验

2.4.8 RNA提取（细胞以35 mm为例，组织以胫骨前肌为例）

2.4.9 逆转录

2.4.10 RT-PCR

2.4.11 Western Blot

2.4.12 小鼠肌肉损伤模型建立

2.4.13 石蜡切片HE染色

2.5 统计学方法

第3章 结 果

3.1 Kirrel2对小鼠骨骼肌成肌细胞分化及融合的影响

3.1.1 Kirrel2在C2C12细胞分化融合、小鼠骨骼肌发育及损伤后修复过程表达情况

3.1.2 过表达Kirrel2对成肌细胞分化融合的影响

3.1.3 过表达Kirrel2对成肌细胞分化和融合没有影响

3.2 探究敲低KirrelA抑制成肌细胞分化及融合的机制

3.2.1 敲低KirrelA后C2C12融合指数降低

3.2.2敲低 KirrelA抑制C2C12融合

3.2.3 敲低KirrelA降低细胞增殖速度

3.2.4 敲低KirrelA对细胞迁移没有影响

第4章 讨 论

第5章 结论

参考文献

作者简介

致谢