不同分子量透明质酸的分离纯化及其在急性肺损伤中的作用研究

目录

声明

第一章 绪 论

1.1 透明质酸研究现状

1.1.1 透明质酸简介

1.1.2 透明质酸的生理功能与应用

1.1.3 透明质酸的制备与纯化

1.1.4 透明质酸与急性肺损伤

1.2 研究目的

1.3 研究方案

(2) 不同分子量HA 在ALI 动物模型中作用探究

(3) LMWHA 和HMWHA 在肺损伤炎症中所起作用的相关指标测定

1.4 预期目标

第二章 特定分子量HMWHA的分离纯化

2.1 实验材料与设备

2.1.1 实验试剂

2.1.2 实验仪器与设备

2.2 实验方法

2.2.1半制备液相色谱法

2.2.2 高压均质法

2.2.3 凝胶过滤层析法

2.3 实验结果

2.3.1 半制备液相色谱法所得HMWHA分子量及分子量分布

2.3.2 高压均质法所得HMWHA分子量及分子量分布

2.3.3 凝胶过滤层析法所得HMWHA分子量及分子量分布

2.4 小结与讨论

2.5 本章小结

第三章 不同分子量HA在ALI动物模型中的作用探究

3.1实验材料与设备

3.1.1 实验动物

3.1.2 实验试剂

3.1.3 实验仪器与设备

3.2实验方法

3.2.1试剂配制

3.2.2 实验分组

3.2.3 麻醉及气管插管手术

3.2.4 支气管肺泡灌洗液的收集

3.2.5 肺组织样品收集及包埋固定

3.2.6 BALF中白细胞计数及分类计数

3.2.7 肺组织HE染色

3.2.8 肺损伤病理学评分

3.2.9 肺组织中各炎症因子mRNA表达量的测定

3.2.10 ELISA检测BALF中细胞因子（IL-1β、IL-6）蛋白表达量

3.2.11 统计学方法

3.3 实验结果

3.3.1 BALF中总细胞计数及分类计数

3.3.2 肺组织病理学变化

3.3.3 各组大鼠肺组织定量组织病理学评分

3.3.4 肺组织炎症因子mRNA表达量测定

3.3.5 BALF中细胞炎症因子（IL-1β、IL-6）蛋白表达量测定

3.4 小结与讨论

3.5 本章小结

第四章 体外细胞实验验证所得不同分子量HA作用

4.1 实验材料与设备

4.1.1 实验试剂

4.1.2 实验仪器与设备

4.2 实验方法

4.2.2 NR8383细胞的复苏、传代、冻存

4.2.3 实验分组

4.2.4 细胞实验处理

4.2.5 qPCR检测细胞炎性因子和趋化因子mRNA表达量

4.2.6 ELISA检测细胞因子（IL-1β、IL-6）蛋白表达量

4.2.7 统计学分析

4.3 实验结果

4.3.1 炎性因子mRNA表达量测定

4.3.2 NR8383细胞炎症因子（IL-1β、IL-6）蛋白表达量测定

4.4 小结与讨论

第五章 结论与展望

5.1 结论

5.2 展望

参考文献

致谢

作者简介

1 作者简历

2 攻读硕士学位期间发表的学术论文

3 参与的科研项目及获奖情况

4 发明专利

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