减毒病毒CHV1在植物细胞与真菌细胞中的跨界传播

目录

主要符号对照表

第一章 文献综述

1.1真菌病毒

1.1.1真菌病毒简介

1.1.2真菌病毒起源与进化

1.2.1减毒真菌病毒的发现

1.2.2减毒病毒CHV1基因组特征

1.3真菌病毒的生物防治

1.4真菌病毒的传播方式

1.4.1真菌病毒的垂直传播

1.4.2真菌病毒的水平传播

1.4.3真菌病毒的胞外传播

1.5病毒跨界侵染现象

1.6本研究的目的和意义

第二章 减毒病毒CHV1在植物细胞中复制

2.1.1实验材料和处理

2.1.2实验试剂及培养基

2.1.3实验仪器

2.2实验方法

2.2.1真菌病毒总RNA的提取

2.2.2减毒病毒CHV1正义链体外转录物的制备

2.2.3真菌病毒摩擦接种普通烟

2.2.4植物单链RNA的提取

2.2.5真菌病毒侵染普通烟RT-PCR检测

2.2.6检测CHV1在普通烟接种叶中的复制情况

2.4.1筛选能够侵染普通烟的真菌病毒

2.4.2减毒病毒CHV1体外转录物侵染普通烟

2.4.3分析减毒病毒CHV1的寄主范围

2.4.4真菌来源的减毒病毒CHV1在普通烟细胞中复制

2.4.5减毒病毒CHV1不能自发地系统性侵染普通烟

2.5讨论与分析

第三章 外源运动蛋白协助减毒病毒CHV1系统性侵染植物

3.1.1实验材料和处理

3.1.2实验试剂及培养基

3.1.3实验仪器

3.2.1减毒病毒CHV1与植物病毒复合侵染普通烟

3.2.2减毒病毒CHV1与TMV复合侵染普通烟继代实验

3.2.3减毒病毒CHV1侵染普通烟-30K

3.2.4减毒病毒CHV1-GFP及CHV1缺失突变体侵染性克隆结构

3.2.5减毒病毒CHV1-GFP侵染普通烟-30K

3.2.6减毒病毒CHV1野生型及缺失突变体侵染普通烟-30K

3.2.7减毒病毒AaHV1摩擦接种普通烟-30K

3.3.1减毒病毒CHV1与植物病毒复合侵染普通烟

3.3.2植物病毒与CHV1复合侵染不影响自身复制

3.3.3减毒病毒CHV1与植物病毒复合侵染普通烟继代实验

3.3.4减毒病毒CHV1系统性侵染普通烟-30K

3.3.5减毒病毒CHV1在植物细胞中的分布

3.3.6减毒病毒AaHV1侵染普通烟-30K

3.2.7减毒病毒CHV1在普通烟-30K全植株中分布

3.3.8减毒病毒CHV1缺失突变体侵染普通烟-30K

3.3.9减毒病毒CHV1野生型及缺失突变体在普通烟-30K中积累量比较

3.3.10植物病毒TMV增加CHV1及其缺失突变体在植物细胞中的积累量

3.4讨论与分析

第四章 减毒病毒CHV1与植物病毒TMV在禾谷镰刀菌Fusarium graminearum中复制

4.1.1实验材料和处理

4.1.2实验试剂

4.1.3实验仪器

4.2.1植物病毒TMV病毒粒子粗提

4.2.2禾谷镰刀菌PH-1原生质体转化

4.2.3转化子的初筛和鉴定

4.2.4真菌双链RNA的提取

4.2.5真菌单链RNA的提取

4.2.6分析CHV1及缺失突变体在PH-1野生型中的积累量

4.2.7减毒病毒CHV1及缺失突变体与TMV复合侵染PH-1野生型

4.2.8蛋白水平检测TMV在禾谷镰刀菌中的表达情况

4.3.1减毒病毒CHV1及其缺失突变体侵染禾谷镰刀菌PH-1

4.3.2减毒病毒CHV1及缺失突变体在PH-1野生型中积累量比较

4.3.3植物病毒TMV侵染禾谷镰刀菌PH-1野生型

4.3.4减毒病毒CHV1增加TMV在PH-1中的积累

4.3.5真菌RNA沉默机制抑制TMV在禾谷镰刀菌中的积累

4.4讨论与分析

第五章 TMV帮助CHV1在植物和真菌间跨界传播

5.1.1实验材料和处理

5.1.2实验试剂

5.1.3 实验仪器

5.2实验方法

5.2.1检测CHV1从真菌细胞传播到植物细胞中

5.2.2拟轮枝镰孢菌与禾谷镰刀菌营养亲和型分析

5.2.3禾谷镰刀菌野生型与拟轮枝镰孢菌接种普通烟

5.2.4菌株的分离培养和检测

5.3实验结果

5.3.1植物病毒帮助减毒病毒CHV1从真菌向植物传播

5.3.2减毒病毒CHV1不能在营养不亲和型菌株间水平传播

5.3.3植物病毒TMV帮助CHV1借助植物在营养不亲和菌株间传播

5.3.4减毒病毒CHV1帮助真菌从植物获得植物病毒

5.4讨论与分析

全文总结与讨论

参考文献

附录A

致谢

个人简历