声明
缩略词
第一章 文献综述
1.1.1 BPA的理化特性
1.1.2 BPA的用途
1.1.3 BPA在人类生活中的分布
1.1.4 BPA的污染状况
1.1.5 BPA的安全标准
1.1.6 BPA的一般作用机制
1.2.1 BPA对生殖发育的影响
1.2.2 BPA对鱼类性别分化的影响
1.2.3 BPA的胚胎发育毒性
1.2.4 BPA的神经系统发育毒性
1.2.5 BPA对生殖内分泌系统的影响
1.2.6 BPA对鱼类的免疫毒性
1.3.1 鱼类的性腺分化
1.3.2 鱼类的性别决定过程
1.3.3 鱼类性别决定相关基因
1.3.4 类固醇激素及相关基因在性别决定中的作用
1.4 选题目的与意义
第二章 亲代BPA暴露对稀有鮈鲫子代胚胎发育及性腺发育的影响
2.1.1 试验用鱼
2.1.2 主要实验仪器及试剂
2.1.3 主要实验溶液及配制
2.2 试验方法
2.2.1 BPA暴露实验及其清水恢复实验
2.2.2 稀有鮈鲫人工繁殖
2.2.3 稀有鮈鲫子代的养护
2.3.1 鱼均产卵量、产卵率和卵径的检测
2.3.2 子代胚胎受精率、胚胎自主运动和胚胎心率的检测
2.3.3 子代胚胎孵化率的检测
2.3.4 子代初孵仔鱼形态学观察及畸形率统计
2.3.5 子代胚胎死亡率及0-20 dph死亡率的统计
2.4 子代生长发育相关指标检测
2.5.1 样品采集
2.5.2 性腺组织学切片的制备与观察
2.5.3 子代雄性精子质量相关指标的评估
2.5.4 类固醇激素及卵黄蛋白原（VTG）水平的测定
2.6 数据处理与分析
2.7 结果
2.7.1 亲代BPA暴露对稀有鮈鲫产卵量、产卵率和卵径的影响
2.7.2 亲代BPA暴露对子代稀有鮈鲫受精率、自主运动及心率的影响
2.7.3 亲代BPA暴露对稀有鮈鲫孵化率及孵化曲线的影响
2.7.4 亲代BPA暴露对子代稀有鮈鲫畸形率和不同畸形类型比率的影响
2.7.5 亲代BPA暴露对子代稀有鮈鲫胚胎死亡率及仔鱼死亡率的影响
2.7.6 亲代BPA暴露对子代稀有鮈鲫性腺发育的影响
2.7.7 类固醇激素及卵黄蛋白原（VTG）水平的测定
2.8 分析与讨论
2.8.1亲代BPA暴露对子代稀有鮈鲫胚胎发育的影响
2.8.2亲代BPA暴露对稀有鮈鲫子代性腺发育的影响
2.8.3亲代BPA暴露对子代稀有鮈鲫性腺分化及性类固醇激素合成的影响
2.8.4 亲代BPA暴露对子代稀有鮈鲫精子质量的影响
2.9小结
第三章 基于转录组测序技术探究亲代BPA 暴露对稀有鮈鲫子代性腺分化的影响
3.1.1 试验动物
3.1.2 主要实验仪器及试剂
3.2 试验方法
3.2.1 样品的采集
3.2.2 总RNA的提取及质量检测
3.2.3 稀有鮈鲫性腺cDNA文库的构建、检测及测序
3.2.4 RNA测序数据的生物信息学分析
3.2.5 实时荧光定量 PCR（qRT-PCR）验证 RNA-Seq 数据的可靠性
3.3 数据分析
3.4 实验结果
3.4.1 性腺总RNA质量检测
3.4.2 转录组测序与组装
3.4.3 Unigene功能注释
3.4.4 基因差异表达分析
3.4.5 差异表达基因的Gene Ontology富集分析
3.4.6 差异表达基因的KEGG富集分析
3.4.7 性腺生殖相关差异基因的筛选
3.4.8 BPA处理后性腺类固醇合成KEGG通路分析
3.4.9 性腺中生殖相关差异基因的qRT-PCR定量验证
3.5 讨论
3.5.1 BPA对精子发生过程相关基因表达的影响
3.5.2 BPA对类固醇合成过程相关基因的表达的影响
3.5.3 BPA对细胞周期调控相关基因表达的影响
3.5.4 BPA对稀有鮈鲫调控卵巢发育过程基因表达的影响
3.5.5 BPA对稀有鮈鲫调控其他生物学过程基因表达的影响
3.6 小结
第四章 亲代BPA暴露并清水恢复后对子代生殖相关基因mRNA表达的影响
4.1.1 试验动物
4.1.2 主要试验试剂及仪器
4.2 试验方法
4.2.1 样品的采集
4.2.2 总RNA的提取
4.2.3 cDNA的合成
4.2.4 定量引物设计与合成
4.2.5 qRT-PCR检测目标基因的mRNA表达
4.3 数据处理及分析
4.4 结果
4.4.1 BPA对调控性腺发育和分化相关基因mRNA表达的影响
4.4.2 BPA对性腺类固醇合成相关基因mRNA表达的影响
4.4.3 BPA对性腺性激素受体基因及vtg基因mRNA表达的影响
4.5 讨论
4.5.1 BPA对调控性腺发育和分化相关基因mRNA表达的影响
4.5.2 BPA对性腺类固醇合成相关基因mRNA表达的影响
4.5.3 BPA对性腺中性激素受体基因及vtg基因mRNA表达的影响
4.6 小结
结论及创新点
结论
创新点
参考文献
附录
致谢
个人简历
西北农林科技大学;
