声明
英文缩略语表
前言
第一部分:棘球蚴组织周围钙化因子高表达
1 实验材料
1.1主要仪器和试剂
1.2实验动物
2 方法
2.1细粒棘球绦虫原头节的提取
2.2泡状棘球绦虫原头节的提取
2.3 C57BL/6小鼠肝棘球蚴动物造模及分组
2.4 Western blot检测上述各组织中RUNX2蛋白表达水平
2.5实时定量PCR( RT-PCR)检测上述各组织中RUNX2 mRNA表达
2.6组织茜素红染色
3 结果
3.1棘球蚴原头节活性鉴定
3.2细粒棘球蚴肝组织和泡状棘球蚴肝组织茜素红染色
3.3 Western blot 和RT-PCR检测钙化因子RUNX2的表达情况
4 讨论
第二部分:完全培养基条件下棘球绦虫原头节对骨髓间充质干细胞钙化影响的研究
1 实验材料
1.1主要仪器和试剂
1.2实验动物
1.3主要溶液的配置
2 方法
2.1小鼠骨髓间充质干细胞(BM-MSCs)的分离和培养
2.2骨髓间充质干细胞的鉴定
2.3共培养实验分组
2.4微量酶标法检测骨髓间充质干细胞碱性磷酸酶(ALP)活性
2.5实时定量PCR( RT-PCR)检测上述各组中细胞BMP2和RUNX2 mRNA表达
2.6 Western blotting检测上述各组中细胞BMP2、RUNX2、Smad1/5/8蛋白表达水平
2.7统计学方法
3 结果
3.1间充质干细胞鉴定
3.2早期矿化标记物ALP活性检测
3.3棘球绦虫原头节与骨髓间充质干细胞共培养 BMP2、RUNX2、P-Smad1/5/8 蛋白的表达
3.4棘球绦虫原头节与骨髓间充质干细胞共培养BMP2、RUNX2 mRNA水平检测
4 讨论
第三部分:成骨诱导分化培养条件下棘球绦虫原头节对骨髓间充质干细胞钙化影响的研究
1 实验材料
1.1主要仪器和试剂
2 方法
2.1成骨诱导分化培养基的配置
2.2共培养实验分组
2.3茜素红染色和定量
2.4小鼠骨髓间充质干细胞碱性磷酸酶检测及钙化相关因子的RT-PCR、Western blot检测方法同第一、二部分实验
2.5统计学方法
3 结果
3.1早期矿化标记物ALP活性检测
3.2成骨诱导分化培养条件下间充质干细胞与棘球绦虫原头节共培养钙沉淀
3.3成骨诱导分化培养条件下间充质干细胞与棘球绦虫原头节共培养钙化相关蛋白表达情况
3.4成骨诱导分化培养条件下间充质干细胞与棘球绦虫原头节共培养钙化相关mRNA表达情况水平检测结果
4 讨论
5 结论
参考文献
文献综述:BMP2/Smad 信号通路对及骨髓间充质干细胞成骨分化的研究进展
致谢
作者简介
石河子大学硕士研究生学位论文导师评阅表
石河子大学;