PHB提高螯虾抗副溶血弧菌侵染能力的免疫机理研究

目录

声明

摘要

1 前言

1．1虾类养殖发展现状

1．1．1水产养殖中的主要病害

1．1．2水产养殖病害主要防治手段

1．2．3 PHB在水产养殖中的应用

1．3短链脂肪酸(SCFAs)

1．3．1 SCFAs作用机理

1．3．2 SCFAs在水产养殖中的应用

1．4甲壳动物免疫系统

1．4．1免疫识别

1．4．2免疫效应机制

1．4．3免疫相关酶

1．4．4免疫信号的传导

1．4．5甲壳动物相关免疫基因的研究

1．5．1研究目的

1．5．2技术路线

2材料与方法

2．1实验动物

2．2仪器设备和试剂

2．3细菌培养

2．4血细胞的培养和分类

2．5血细胞两种凋亡检测方法的建立

2．6菌体的荧光标记

2．7．2 HM-PHB与血细胞体外孵育实验

2．8 3-羟基丁酸对血细胞和V．parahaemolyticus的作用

2．8．3 3-羟基丁酸对血细胞吞噬V．parahaemolyticus的影响

2．8．4血细胞酶活检测

2．8．5血细胞转录组分析

2．9数据分析

3 结果

3．1血细胞的显微观察以及流式细胞分群

3．2血细胞凋亡定性分析

3．3荧光标记菌体

3．3．2 FITC标记V．parahaemolyticus

3．4．1荧光显微镜观察

3．4．2流式细胞检测

3．4．3透射电镜观察

3．4．4HM-PHB作用下血细胞对V．parahaemolyticus的吞噬

3．5体外培养血细胞与HM-PHB作用

3．5．1荧光显微镜观察

3．5．2流式细胞检测

3．6 3-羟基丁酸对血细胞和V．parahaemolyticus的作用

3．6．2 3-羟基丁酸对血细胞的毒性检测

3．6．3 3-羟基丁酸对血细胞吞噬V．parahaemolyticus的影响

3．7血细胞中酶活力检测

3．8转录组分析结果

3．8．1血细胞RNA的浓度和纯度

3．8．2转录组拼接结果

3．8．3转录组序列注释

3．8．4差异基因富集分析

3．8．5差异表达基因

4讨论

5 结论

5．1结论

5．2论文的创新点

5．3论文的不足之处

6 展望

参考文献

8攻读硕士学位期间发表论文情况

致谢