蜣螂疏水壳聚糖的止血作用及其机制初探

摘要

研究背景　　据统计每年各类伤害发生上亿次，而失血过多则是导致受创致死的最主要因素，因此，受创后急救止血是治疗的关键。传统急救止血材料如普通纱布、止血带或绷带等，止血效果有限，难以适应复杂出血的情况，急需更加灵活、简便高效的止血材料。受创后止血过程最早的反应程序是血管收缩，从而减慢血流，促进凝血及止血。止血材料要起作用，通常是聚集血小板和激活凝血系统来实现，但目前还没有一种能够完全满足作为理想急救止血剂的材料。壳聚糖由于其优越的生物相容性、可降解性、安全性，以及兼具抗菌特性和成本低廉等特点，是一种最具潜力的可不断开发的急救止血剂。　　研究目的　　从蜣螂疏水壳聚糖的制备与表征、止血效果考察和机制探究三方面揭示其作为止血材料的可行性，并探究影响其止血的因素，为新型止血材料的开发提供实验依据。研究方法　　采用实验室自主专利技术提取制备蜣螂疏水壳聚糖，对制备产物进行表征，通过元素分析仪和接触角等仪器进行理化分析，以红外光谱仪和核磁波谱仪对其进行结构分析，以CCK8和流式细胞仪对其进行生物学评价。采用血液凝集和止血实验研究蜣螂疏水壳聚糖的止血功效，再以此为基础进一步研究其与血液中主要成分如红细胞、核酸、蛋白和无机盐等成分之间的作用关系，从而初步探明凝血机制。　　结果和结论　　蜣螂壳聚糖提取产率约为17.27%，蜣螂疏水壳聚糖改性产率约为91.54%。蜣螂疏水壳聚糖与疏水市售壳聚糖相比，溶解性好，黏度低，取代度高。接触角、红外、核磁结果显示合成了疏水壳聚糖。生物学评价结果显示，蜣螂疏水壳聚糖对细胞无毒性作用；血液凝集与小鼠凝血实验表明，蜣螂疏水壳聚糖具有优良的止血作用；止血机制探究表明，蜣螂疏水壳聚糖与细胞膜上的物质有着某种作用，能富集细胞，改变细胞膜的通透性，从而牢固链接各个细胞。核酸和蛋白与蜣螂疏水壳聚糖之间均无凝集作用，而无机盐离子与蜣螂疏水壳聚糖之间存在牢固的离子键合作用，能形成离子凝胶。因此，推断蜣螂疏水壳聚糖能与血液中的血细胞和无机盐作用形成血凝块而止血，而非依赖瀑布凝血机制。

目录

第一章 绪论

1.1 临床止血材料概述

1.2.1 机体自身凝血机制

1.2.2 止血材料凝血机制

1.3.1 壳聚糖简介

1.3.2 蜣螂壳聚糖

1.3.3 壳聚糖止血机制进展

1.4.1 研究目的

1.4.2 研究意义

1.5 研究内容

1.5.1 蜣螂疏水壳聚糖的制备与表征

1.5.2 蜣螂疏水壳聚糖止血效果研究

1.5.3 蜣螂疏水壳聚糖止血机制研究

1.6 技术路线

第二章 材料与方法

2.1.1 仪器

2.1.2 试药

2.1.3 动物及其他材料

2.2 实验方法

2.2.1 蜣螂疏水壳聚糖的制备

2.2.2 蜣螂疏水壳聚糖的表征

2.2.3 蜣螂疏水壳聚糖止血效果研究

2.2.4 蜣螂疏水壳聚糖止血机制研究

第三章 结果与分析

3.1 蜣螂疏水壳聚糖的制备

3.2.1理化表征

3.2.2 结构表征

3.2.3 生物学表征

3.3.1 血液凝集实验

3.3.2 小鼠肝脏创面止血实验

3.4.1 血液组分对凝集效果的影响

3.4.2 生物膜结构对凝集效果的影响

3.4.3 无机盐对凝集效果的影响

第四章 结论

4.1 蜣螂疏水壳聚糖的制备

4.2 蜣螂疏水壳聚糖止血效果

4.3 蜣螂疏水壳聚糖止血机制

致谢

参考文献

攻读学位期间发表的学术论文及研究成果