英文缩略词表
前言
1 材料与方法
1.1 Hela细胞培养
1.2 Hela细胞总RNA的制备(异硫氰酸法)
1.3 mRNA的制备(oligo(dT)层析法)
1.4 cDNA第一链的合成以及RT-PCR
1.5 p16第二外显子cDNA PCR产物的纯化
1.6 pGEMT质粒与p16第二外显子cDNA连接
1.7感受态细胞的制备和转化
1.8质粒提取及定量
1.9阳性克隆鉴定
1.9.1重组质粒DNA酶切图谱分析
1.9.2 DNA序列分析
1.10 p16基因第二外显子cDNA的制备及纯化
1.11 p16基因第二外显子cDNA探针的标记
1.12 p16基因第二外显子Southern Blotting方法的建立
1.13胸水DNA的制备
2 结果
2.1 pGEM-p16克隆的构建及其p16基因第二外显子纯合性缺失PCR分析方法的建立
2.1.1 pGEM-p16重组质粒的限制性内切酶酶切图谱分析
2.1.2 DNA序列分析
2.1.3 p16基因第二外显子cDNA的制备
2.1.4 Southern blot结果
2.1.5 p16基因第二外显子纯合性缺失PCR分析方法的建立
2.2临床胸水标本p16、p15基因纯合性缺失的分析
2.2.1癌性胸水中多肿瘤抑制基因(p16、p15)基因纯合性缺失率
2.2.2多肿瘤抑制基因(p16、p15)基因纯合性缺失和其他确诊方法
2.2.3 31例癌性胸水p16基因第二外显子纯合性缺失情况
3 讨论
3.1 pGEM-p16克隆的构建及其p16基因第二外显子纯合性缺失PCR分析方法的建立
3.1.1 pGEM-p16克隆的构建
3.1.2 p16基因第二外显子纯合性缺失PCR分析方法的建立
3.2 p16基因的作用及其在肺癌、癌性胸水中的研究意义
3.2.1 p16基因在细胞周期中作用
3.2.2 p16基因研究在肺癌及癌性胸水中的临床意义
4 结论
参考文献
对本课题的进一步设想
致谢
个人简历
在学期间的研究成果目录
综述-p16基因与肺癌关系的研究进展
1 p16基因在细胞周期中的作用
2 p16基因异常与肺癌的发生和发展
2.1 p16基因缺失与肺癌
2.2 p16基因点突变与肺癌
2.3 p16基因甲基化与肺癌
3 p16基因与肺癌基因治疗研究
4 p16的临床研究进展
5 结语
参考文献