重组Ig结合分子噬菌体展示文库的构建及选择研究

摘要

定向分子进化是探索研究生物大分子结构与功能的重要手段,同时也是改造、优化生物大分子特性的有效方法.噬菌体展示及筛选和DNA重排是体外定向分子进化的重要核心技术.protein A和protein L是两种不同的细菌表面蛋白,均可与Ig结合,但各自有不同的特点.该研究应用DNA重排技术将protein A的单个抗体结合结构域和protein L的单个抗体结合结构域随机组合,构建了重组Ig结合多肽PALn分子文库,并采用噬菌体展示技术结合体外定向进化IgG亲和筛选,探究Ig结合分子的结构和功能的关系,同时为定向改造Ig结合分子打下基础.该研究分四个部分:一、新型噬菌体展示载体pCANTAB5S的构建;二、噬菌体展示Ig结合多肽PLn分子文库的构建及筛选;三、噬菌体展示Ig结合多肽PALn分子文库的构建及筛选;四、(MDPL-MDPA)n代表分子的原核表达、纯化及功能鉴定.

目录

英文略缩语

前言

第一部分新型噬菌体展示载体pCANTAB5S的构建

1主要材料

2实验方法

3结果

4讨论

第二部分噬菌体展示Ig结合多肽PLn分子文库的构建及筛选

1主要材料

2主要方法

3结果

3讨论

第三部分噬菌体展示Ig结合多肽PALn分子文库的构建及筛选

1主要材料

2主要方法

3结果

3讨论

第四部分(MDPL-MDPA)n代表分子的原核表达、纯化及功能鉴定

1主要材料

2主要方法

3结果

4讨论

总结

参考文献

附录 个人简历

致谢

综述 Ig结合分子研究进展