去甲二氢愈创木酸对小鼠胚泡植入的影响

摘要

目的:①研究去甲二氢愈创木酸(nordihydroguaiaretic acid，NDGA)对小鼠胚胎早期发育的影响；②用NDGA处理植入前期小鼠后观察子宫内膜光镜和超微结构变化；③研究NDGA处理植入前期小鼠后子宫内膜基质金属蛋白酶-9(matrixmetalloproteinase-9，MMP-9)与基质金属蛋白酶组织抑制物-1(tissue inhibitor 0fmetalloprotdnaso-1,TLMP-1)表达的变化。 方法:以成年未经产雌性昆明种小鼠为研究对象，雌雄鼠3:1合笼，第二天清晨查到阴栓记作孕1d，将120只孕2d小鼠随机分4组(低剂量、中剂量、高剂量和对照组)，每组30只，低剂量、中剂量、高剂量组分别按10 mg/kg，30 mg/kg，90mg/kg剂量皮下注射NDGA，对照组注射等量PBS溶液；孕4d，每组各取15只孕鼠，颈椎脱臼处死，取出子宫，刮取约lmm3子宫内膜组织，戊二醛固定，透射电镜分析子宫内膜结构的变化，余下子宫组织4％多聚甲醛固定，HE染色、免疫组化SP法检测MMP-9、TIMP-1表达，显微成像系统拍摄图像，进行计算机图像分析；孕8d，处死另半数孕鼠检测子宫脏器系数和胚胎着床数。 　　结果:①NDGA对小鼠子宫脏器系数、植入胚胎数的影响：对照组小鼠子宫脏器系数(2.387±0.376)％，植入胚胎数15.87±1.92，低剂量组小鼠子宫脏器系数(2.3414-0.106)％，植入胚胎数14.93±1.79，与对照组相比无显著差异(P>0.05)；中剂量组小鼠子宫脏器系数(1.350±0.010)％，植入胚胎数8.27±0.96，与对照组相比，有不同程度的减少(P<0.05)，高剂量组小鼠子宫脏器系数(0.850±0.287)％，与对照组相比，显著下降(P<0.01)，未见胚胎植入。②NDGA对小鼠子宫内膜形态学的影响：光镜观察结果显示，对照组与低剂量组小鼠子宫内膜发育明显，基质疏松、基质细胞肥大，腺上皮细胞与腔上皮细胞柱状。中剂量组与高剂量组小鼠子宫内膜基质结构较为紧密、基质细胞变小，子宫内膜腺上皮细胞与腔上皮细胞变矮。透射电镜结果表明，对照组与低剂量组小鼠子宫内膜基质细胞胞膜完整，胞质内富含粗面内质网、线粒体，腺上皮与腔上皮富含线粒体，表面可见短小微绒毛；中剂量组与高剂量组小鼠子宫内膜基质细胞边界不清，腺上皮细胞与腔上皮细胞线粒体空泡变性。③)NDGA对小鼠子宫内膜MMP-9与TIMP-1表达的影响：免疫组织化学SP法染色结果显示，MMP-9与TIMP-l在对照组小鼠子宫内膜基质细胞、腺上皮细胞与腔上皮细胞中均有阳性表达；与对照组相比，低剂量组小鼠子宫内膜基质细胞、腺上皮与腔上皮细胞MMP-9与TIMP-1免疫阳性细胞的平均光密度值(mean optical density,MOD)差异无显著性(P>0.05)，中剂量组与高剂量组小鼠子宫内膜基质细胞、腺上皮与腔上皮细胞MMP-9与TIMP-1免疫阳性细胞的MOD值与对照组相比，差异具有显著性(P<0.05)。 结论:①NDGA可能具有抑制小鼠胚胎植入的作用且此作用具有一定的剂量依赖性；②NDGA可以使植入前期小鼠子宫内膜基质细胞、腺上皮与腔上皮细胞发生不同程度的变性；③NDGA可能对植入前期小鼠子宫内膜基质细胞、腺上皮细胞与腔上皮细胞MMP-9，TIMP-1的表达具有抑制作用；④植入前期小鼠子宫内膜MMP-9与TIMP-1表达失衡可能是NDGA诱导胚泡着床障碍的机制之一。

目录

论文说明：英文缩略词表

声明

摘要

1前言

2材料与方法

3结果

4讨论

5小结

6展望

参考文献

附录

致谢

文献综述：基质金属蛋白酶与胚泡植入