兔口腔Vx-2肿瘤模型建立的实验研究

摘要

Vx-2肿瘤细胞株广泛用于建立临床各种疾病的试验研究，该瘤株具有易于移植、生长迅速和侵袭性强的特点其形态学和生物学特性与人鳞状细胞癌相似；可接种于多种类型兔的多个部位，我们应用兔Vx-2肿瘤细胞株建立口腔Vx-2肿瘤动物模型，期望为进一步研究口腔颌面部肿瘤提供一种适用的动物实验模型。 方法：首先对Vx-2肿瘤细胞株进行相应的复苏培养传代，建立荷瘤兔从而获得实验中移植需要的肿瘤组织块；30只新西兰大白兔，雌雄不限，兔龄2-3月，体重1.5～2.0kg，并随机分为两组，均在标准实验室饲养保证载体具有较高的相似性；从荷瘤兔身上取肿瘤组织并制备成移植所用的一定大小肿瘤组织块，采用口内和口外两种途径植入Vx-2肿瘤细胞株，建立兔颊部Vx-2肿瘤模型，然后通过观察载瘤兔精神、食欲、活动对两组试验兔进行比较，对肿瘤一般生长状况即肿瘤体积的测量进一步对两组试验兔进行比较，最后对肿瘤组织做病理HE染色、流式细胞仪检测肿瘤细胞凋亡率来对两组肿瘤性质进行比较，从而对两种植入方法在成瘤率上有无显著性差异和对兔颊部Vx-2肿瘤的基本特质进行初步探索。 结果： 无论口内、口外哪种方法植入Vx-2肿瘤细胞组织块，2周后均可成功的建立兔颊部Vx-2肿瘤模型，成瘤率为100％，且整个建模过程操作简单，接种成功率高。两组载瘤兔精神、饮食、活动等特点基本无明显差异。观察动物模型发现Vx-2肿瘤经历了肿瘤迅速增长、肿瘤中心坏死、表面破溃等阶段，生存期约为4～6周，对其肿瘤体积的粗略测量发现两组肿瘤体积在生长速度上无显著性差异，对肿瘤组织做HE染色提示为低分化鳞状细胞癌，这与以前诸多学者研究结果相同。两组肿瘤组织凋亡率之间比较也无显著性差异(P>0.05)。 结论： 过Vx-2肿瘤细胞株接种而建立的兔口腔颊部鳞癌模型具有在短时间内易于建立、性质稳定、重复性好、成瘤率高、操作简单等多种特点，组织学观察为鳞状细胞癌表现，为口腔鳞癌的生物学、治疗学等实验研究，将提供一个大型的良好的动物模型。且在本实验中采用Vx-2肿瘤组织块兔口内、口外两种途径植入建立动物模型发现两种方法无论在肿瘤性质、肿瘤生长特点等均无显著性差异.

目录

论文说明：英文缩略词表

声明

摘要

1.前言

2.实验材料和方法

2.1 Vx-2肿瘤组织来源

2.2实验动物

2.3主要试剂

2.3仪器

3实验方法

3.1兔Vx-2肿瘤细胞的培养和传代

3.2兔Vx-2细胞的冻存和复苏方法

3.3荷瘤兔的建立

3.4 口腔动物模型的建立

3.5肿瘤一般生长状态观察、病理学及流式细胞仪检查

3.6观察指标

3.6.1细胞培养阶段形态学观察

3.6.2肿瘤体积的测量

3.6.3石蜡切片HE染色

3.6.4流式细胞仪Annexin V/PI双染色法测细胞凋亡

3.7统计学分析

4.结果

4.1细胞形态

4.2种植成瘤率

4.3实验兔一般状况观察

4.4移植瘤体形态学观察

4.5肿瘤细胞凋亡率的检测

5.讨论

5.1兔Vx-2肿瘤细胞株

5.2 口腔肿瘤模型的研究进展

5.3兔Vx-2肿瘤细胞株在口腔中的应用

6结论

7展望

8参考文献

附录

致谢

综述：口腔肿瘤动物模型建立的研究进展

附图