调控系统性红斑狼疮TOLL样受体9/髓样分化因子88信号通路的意义

摘要

目的：探讨调控TOLL样受体9（TLR9）/髓样分化因子88（MyD88）信号通路在系统性红斑狼疮（SLE）的意义。
　　 方法：收集2008年12月至2009年3月我院住院SLE患者35例，均符合1997年美国风湿病学院（ACR）修订的SLE分类标准，其中女性32例，男性3例，年龄15～70岁，平均（38±13）岁。15例正常对照为健康志愿者，其中女性10例，男性5例，年龄13～55岁，平均（37±8）岁。SLE患者均未用过羟基氯喹（HCQ），除外感染。参考美国风湿病学院的SLE疾病活动性指标（SLE disease activity index，SLEDAI）对其疾病活动进行评分，20例患者SLEDAI积分≥10为疾病活动，15例患者SLEDAI积分<10为疾病稳定。分离SLE患者和正常对照外周血单核细胞（PBMC），并以1 μmol/L寡脱氧核苷酸（CpG ODN）2216刺激并培养24h，反转录-聚合酶链反应（RT-PCR）检测刺激前后TLR9、MyD88 mRNA的水平变化，分别比较活动组、稳定组与正常对照组间TLR9、MyD88 mRNA表达水平的差异，分析活动患者TLR9、MyD88 mRNA的表达水平与SLEDAI、补体等指标的相关性；酶联免疫吸附法（ELISA）检测上清液中IFN-α水平。10例SLE患者，以1 μmol/L CpG ODN2216刺激PBMC培养2h，再加入1 μmol/L HCQ培养16h，RT-PCR检测HCQ刺激前后TLR9、MyD88 mRNA的水平变化。
　　 结果：SLE患者PBMC中TLR9、MyD88 mRNA水平明显高于正常对照（p<0.01）；活动患者TLR9、MyD88 mRNA水平明显高于稳定患者（p<0.01）；活动患者TLR9 mRNA水平与疾病活动度评分（SLEDAI）正相关（rs=0.471,p<0.05），与C3、C4负相关（rs=-0.479，rs=-0.493,p<0.05）。CpG ODN2216刺激后SLE患者PBMC 中TLR9、MyD88 mRNA水平明显升高（p<0.01,p<0.05）；活动患者培养上清中IFN-α的水平显著升高（p<0.01）。CpG ODN2216 加HCQ组TLR9、MyD88 mRNA水平明显低于无HCQ刺激组（p<0.001）。
　　 结论：SLE患者TLR9/MyD88信号通路明显活化，CpG ODN2216通过上调TLR9、MyD88 mRNA的表达，诱导pDC分泌IFN-α增加，促进疾病进展。阻断TLR9/MyD88通路活化可能是治疗SLE的一种有效手段。HCQ可能通过下调TLR9、MyD88 mRNA的表达，抑制CpG ODN2216诱导的TLR9/MyD88信号通路活化。