西红花及其内生真菌GGPPS基因克隆与内生真菌抗氧化研究

目录

第一章 文献综述

1.1 引言

1.2 西红花概述

1.2.1 西红花的化学成分

1.2.2 西红花药理作用研究

1.2.3 西红花中类胡萝卜素及其衍生物的生物合成途径

1.3 植物内生真菌概述

1.3.1 内生真菌的多样性

1.3.2 内生真菌的化学成分与活性

1.3.3 植物与内生真菌的相互关系

1.4 类胡萝卜素生物合成分子生物学

1.4.1 类胡萝卜素生物合成途径

1.4.2 GGPP合成酶基因与功能

1.5 内生真菌的抗氧化研究进展

1.6 本课题研究目的和方法

第二章 材料与方法

2.1 材料

2.1.1 实验材料

2.1.2 载体及宿主菌

2.1.3 试剂盒、酶及引物

2.1.4 培养基等常用液的配制

2.1.5 主要仪器与设备

2.2 实验方法

2.2.1 西红花内生真菌3P1CQ1的GGPPS保守片段的克隆

2.2.2 西红花内生真菌3P1CQ1的GGPPS基因3′ 端和5′ 端的克隆

2.2.3 西红花内生真菌GGPPS的cDNA克隆

2.2.4 西红花内生真菌GGPPS基因的克隆

2.2.5 GGPPS蛋白质生物信息学分析

2.2.6 GGPPS基因功能验证

2.2.7 西红花GGPPS基因DNA和cDNA克隆

2.2.8 西红花GGPPS基因与其内生真菌3P1CQ1的GGPPS基因比较

2.1 实验材料

2.1.1 材料

2.1.2 试剂

2.1.3 主要仪器与设备

2.2 实验方法

2.2.1菌种的活化

2.2.2 内生真菌的发酵培养

2.2.3代谢产物提取与分离

2.2.4菌丝体生物量测定

2.2.5不同菌株发酵提取液的抗氧化能力的活性比较

2.2.6不同菌株发酵提取液的HPLC-DAD分析

2.2.7菌株1P2CQ1抗氧化成分分离

2.2.8 菌株1P2CQ1馏分的抗氧化比较

2.2.9菌株1P2CQ1抗氧化活性物质的LC/MS检测和抗氧化能力测定

第三章 结果与讨论

3.1 西红花内生真菌3P1CQ1的GGPPS保守片段的克隆

3.2西红花内生真菌3P1CQ1的GGPPS基因3'端和5'端的克隆

3.3 西红花内生真菌GGPPS的全长克隆

3.4 GGPPS蛋白质生物信息学分析

3.5 GGPPS基因功能验证

3.6西红花GGPPS基因克隆

第二部分 西红花内生真菌抗氧化的初步研究

3.1 菌丝体生物量测定

3.2不同菌株发酵提取液的抗氧化能力的活性比较

3.3 不同菌株发酵提取液的HPLC-DAD分析

3.4菌株1P2CQ1抗氧化成分分离和抗氧化活性分析

3.5 结果讨论

第四章 总结与展望

参考文献

致谢

攻读学位期间的研究成果

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