狗牙根和海滨雀稗的形态特征与AFLP遗传多样性研究

摘要

随着我国经济持续、高速的发展，草坪面积不断增长，从庭院、园林绿化向运动场、水土保持、风沙治理、盐碱地改良等领域拓展。城市化进程的加快给我国草坪业带来了快速发展的契机。但我国90％以上的草坪草种是依靠国外进口。这些引进种在生物学方面对当地的不适应性以及造成的生态问题随着引进规模的扩大而日显突出，开发和利用国产优质草坪草种是我国草坪业亟待解决的问题。我国复杂多样的气候、地形、土壤等环境使我国野生的草坪草资源拥有丰富的生态类型和遗传变异特性，开发前景大，已引起国内育种专家的重视。为了更好地开发利用丰富的野生草坪草种质资源，本研究采用AFLP标记技术对狗牙根和海滨雀稗材料的种质鉴定及遗传多样性等进行了研究。　　本试验以收集到的36份野生种及栽培种狗牙根为研究材料，从形态学特征和DNA分子水平上对供试材料的遗传多样性进行研究，目的是为了探明种源材料的遗传关系，以期建立指纹图谱，为狗牙根野生种质资源的有效保护、开发利用和核心种质的构建提供理论和科学实践数据。研究结果表明：（1）16对带型稳定、清晰均匀、多态性好的引物对，共扩增多态性标记327个，多态性位点比率为81.75%，各供试材料之间存在着明显的差异；（2）引物组合E47M48、E33M48、E47M63、E51M66、E47M59所构建得DNA特异性指纹图谱可将供试材料相互区分开；（3）供试材料的AFLP相似系数在0.5286-0.8857之间。从分子聚类分析结果可看出，所有材料在相似性系数0.590处聚为一大组，其中来自3个省份的31份野生狗牙根材料除了6、7、21号材料之外，在相似性系数0.698处聚为一大组，表现出较近的亲缘关系；（4）供试材料的形态学特征遗传距离（TD）在0.483-7.960之间。结果表明，在遗传距离为9.21-10.95之间，可将供试材料聚为三类。其中来自福建的共10份野生狗牙根材料中除了13、16、19号材料之外，在遗传距离为4.01处来自浙江金华的1号材料聚为类Ⅰ。　　为解决海滨雀稗（Paspalum vaginatum）大面积营养扩繁过程中品种纯度问题，本研究利用AFLP分子标记技术，结合形态学特征，对海滨雀稗品种‘Salam’、‘SeaSpray’、‘SeaDwarf’、‘SeaIsle2000’和一个‘SeaDwarf’粗茎变异株系进行了遗传差异分析，旨在探讨海滨雀稗品种的快速鉴别方法。结果表明：（1）海滨雀稗的形态学遗传距离与AFLP分子标记相似系数的聚类结果一致，均表明‘Salam’和‘SeaSpray’之间的遗传差异较小，可以聚为一类，‘SeaDwarf’和‘SeaIsle2000’的亲缘关系较近，可以聚为另一类；（2）‘SeaDwarf’粗茎变异株系与‘SeaDwarf’之间的AFLP分子标记的遗传相似系数为0.5281，形态学遗传距离是4.8570，均表明二者之间遗传差异较大，无论在形态特征、还是AFLP分子标记均证实了‘SeaDwarf’粗茎株系确实已经变异；（3）有11对随机组合引物的AFLP带型稳定、清晰均匀、多态性好，海滨雀稗不同品种的AFLP指纹图谱存在着明显差异；（4）找到了区分海滨雀稗品种的8个DNA特征谱带，进一步说明AFLP分子标记的方法有可能用于海滨雀稗品种或者突变体的辅助鉴定。

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第一章 文献综述

1.1草坪植物种质资源保护的重要性

1.2植物遗传多样性

1.3草坪植物种质资源的利用和创新

1.4 本课题的研究目的和主要内容

第二章 研究思路、内容及方法

2.1 实验目的及研究思路

2.2试剂和仪器设备

2.3实验方法

2.4数据统计与分析

第三章 基于AFLP的狗牙根遗传多样性分析

3.1 引言

3.2 材料与方法

3.3 结果与分析

3.4 讨论

第四章 海滨雀稗栽培品种的形态特征与AFLP分子标记

4.1 引言

4.2 材料与方法

4.3 结果与分析

4.4 讨论

第五章 结论

参考文献

致谢

攻读硕士期间已发表的论文或录用的论文