半导体激光和5-氟尿嘧啶缓释植入剂对口腔肿瘤细胞抑制作用实验研究

摘要

目的:口腔恶性肿瘤是世界上最常见的恶性肿瘤之一,占全身恶性肿瘤的5％左右,其中90%为上皮来源的鳞状细胞癌,近年来口腔恶性肿瘤的发病率呈上升趋势,发病的年龄也趋于年轻化,因而探索口腔恶性肿瘤的发病机制进而寻找积极有效的预防途径成为一项十分迫切的重要任务,有学者认为实质性肿瘤两个主要特征之一是大量的新生血管形成,恶性肿瘤细胞通过新生的血管组织获得必要的养分,带去大量的新陈代谢产物,同时瘤细胞穿过新生的毛细血管经由血路远处转移,血管生成源于已存在的毛细血管和毛细血管后微静脉的新的毛细血管性血管的生长,新生血管对于肿瘤的生长,浸润及转移具有重要的意义,肿瘤只有具备了血管生成表型后才能恶性生长和发生成功的转移,血管的新生也是决定口腔恶性肿瘤生长、分化、侵袭和转移的关键因素。
　　方法:选择人口腔上皮细胞株KB细胞和人涎腺腺样囊性癌(ACC-3)肿瘤的细胞,复苏后予以培养在24盘培养孔中24小时,随机分为半导体激光照射组加5-Fu缓释剂作用组和对照组,采用半导体激光照射加入5-Fu缓释植入剂的口腔肿瘤细胞,半导体激光照射组以输出功能130mw连续照射30、60、120、180、240、300秒,照射之后细胞再培养24小时,24小时后计算细胞数并用蛋白电泳分析。西方墨点法和免疫荧光染色法来观察增生性细胞核抗原(ProliferatingcellNuclearantigen.PCNA)组蛋白,细胞角质分子、微小管、SYnemin和Plectin等细胞增殖数量是以细胞数目的计算与PCNA、Histone的表现评估,微小管、细胞角质、Plectin和Synemins的表现则代表细胞骨架的稳定性是否会受到半导体激光照射的影响。
　　结果:结果显示肿瘤的细胞数目PCNA和Histone的表现均出现减少,显示出人口腔上皮细胞株KB细胞和人涎腺腺样囊性癌(ACC-3)肿瘤的细胞增生在实验中均受到抑制,对人口腔上皮细胞株KB细胞和人涎腺腺样囊性癌(ACC-3)肿瘤的细胞影响最大的照射时间分别是90秒和120秒(能量密度分别是5.85J/cm2和7.8J/cm2),在此剂量的照射下,人口腔上皮细胞株KB细胞和人涎腺腺样囊性癌(ACC-3)肿瘤的细胞减少率分别为76%和66%,除此之外,实验中这些细胞的微小管和中间型结构的完整性也受到破坏,中间型丝相关蛋白中Pleetin和Synemin的表现也被减少了。
　　结论:半导体激光和5-氟尿嘧啶缓释植入剂会抑制人口腔上皮细胞株KB细胞和人涎腺腺样囊性癌(ACC-3)肿瘤细胞的抑制效应,表现为两个方面的效应:(1)抑制细胞有丝分裂,使细胞增殖停止和减缓,导致细胞数目减少,半导体激光和5-氟尿嘧啶缓释植入剂抑制Histome的产生,使得DNA不能正常复制,因而降低了人口腔上皮细胞株KB细胞和人涎腺腺样囊性癌(ACC-3)肿瘤细胞的增殖;(2)半导体激光和5-氟尿嘧啶缓释植入剂通过影响细胞代谢或结构,加速细胞的死亡,这种抑制作用的机制可能是由于Plectin和Synemin等中间型丝相关蛋白的表现受半导体激光和5-氟尿嘧啶缓释植入剂影响而下降,不足的Plectin和Synemin则造成微小管和细胞角质分子结构的改变而失去支撑细胞的功能,为临床治疗恶性肿瘤提供相关的理论基础。

目录

目录

中文摘要

英文摘要

1、前言

2、 材料与方法

2．1、材料种类及其来源：

2.2、实验方法

2．3、设备

2．4、半导体激光照射及5-FU缓释剂植入

2．5、细胞角质分子及其相关蛋白的粗萃取

2．6、从人口腔上皮细胞株 KB 细胞和人涎腺腺样囊性癌（ACC-3）细胞中分离出细胞核

2．7、蛋白质电泳分析

2．8、免疫荧光染色法

2．9、Liu’s染色法

3 结果

3．1、半导体激光照射及5-FU缓释剂植入对人类口腔鳞癌细胞生长的影响

3．2、半导体激光照射及5-FU缓释剂植入抑制人类口腔鳞癌细胞生长的机制

4 讨论

5 总结与展望

参考文献

附录

致谢

綜述