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海水浸泡对兔胫骨开放性骨折愈合进程影响的相关研究

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前言

材料与方法

材料

2.实验仪器及试剂:

主要试剂:

方法

结果与分析

1.一般情况

2.电镜观察:

3.光镜观察

4.VEGF表达

5.TGF-β1表达:

讨论

参考文献

附录

1 本人简历

2 在学期间的研究成果目录

3 参加科研项目及课题申请

致谢

综述

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摘要

目的:本实验以兔后肢开放性骨折合并海水浸泡伤为实验模型,取骨折处骨痂及周围组织进行组织学观察及并检测骨痂中相关细胞因子表达情况,探讨海水浸泡对兔胫骨开放性骨折愈合进程的影响及发生机制,为海水浸泡开放性骨折的相关临床治疗提供理论依据。
  方法:将新西兰兔44只,随机分为实验组和对照组各22只,均造成双侧胫骨横行骨折。实验组切口浸泡于人工海水中3h,对照组切口旷置于空气中3h,清创后依次缝合伤口,后分笼饲养。分别于第7、14、21、28天处死动物,取实验组及对照组胫骨骨折处骨痂及周围组织标本,处理后电镜和光镜下观察成骨细胞损伤情况、组织中血管内皮生长因子(VEGF)和转移生长因子-β1(TGF-β1)的表达及骨痂形成情况。
  结果:(1)电镜下,实验组骨折处骨痂中成骨细胞在骨折后第7-14天可见明显损害,主要表现为胞膜及核膜破坏、线粒体肿胀空泡变、胞核溶解坏死。21及28天可见实验组成骨细胞形态基本恢复正常。对照组成骨细胞在骨折后第7-14天结构无损害,粗面内质网扩张,显示出细胞代谢旺盛,21天及28天组成骨细胞形态上与实验组无明显差别。(2)免疫组化检测显示对照组骨痂中VEGF及TGF-β1的表达于骨折后逐渐增强,至14天时达到高峰,之后呈减弱趋势;实验组VEGF及TGF-β1的表达未见明显延迟,峰值时间与对照组相近,但各时段表达强度均明显弱于对照组。(3)通过对骨折断端周围骨痂的病理学观察发现,28天时对照组骨痂完全为骨性骨痂者共15肢,占75%,为混合性骨痂(即软骨骨痂与骨性骨痂共存)者共5肢,占25%;实验组骨痂完全为骨性骨痂者共6肢,占30%,为混合性骨痂者共14肢,占70%,两组相比相差显著(P<0.05)。
  结论:肢体开放性骨折经海水浸泡3h后,骨折处成骨细胞发生损害,功能受到抑制,同时海水的浸泡对组织中生长因子(VEGF及TGF-β1)的表达也产生影响,可导致骨再生膜内成骨及软骨内成骨进程延缓,骨折愈合延迟。

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