Y染色体微缺失和TEX15基因单核苷酸多态性对精子发生障碍的影响

摘要

本文主要从以下几个部分展开论述：
　　第一部分 Y染色体微缺失对精子发生障碍的影响
　　目的:Y染色体长臂(Yq)无精子因子(AZF)区域微缺失是导致男性不育的重要因素之一。AZF微缺失对精子发生障碍的遗传学风险,其基因型与表型的关系有待于进一步阐明。在不同Y染色体遗传背景下,AZF缺失呈现不同的发生频率,并对精子的发生因种族不同而有差异。本研究拟对一定数量的人群进行Y染色体微缺失检测,并探讨不同缺失类型在精子发生障碍患者中的分布频率且与中国汉民族先天性男性不育患者睾丸大小、性激素水平的关系。
　　方法:实验组选择209例非梗阻性无精子症患者及123例严重少精子症患者,对照组选择377例已正常生育且精液质量正常的男性。参照欧洲男科协会(EAA)和欧洲分析遗传实验质控网(EMQN)Yq AZF微缺失指南,对Y染色体序列标签点(sequence-tagged site,STS)引物序列和多重PCR反应条件优化改良,筛查AZFa、b、c区域的微缺失。
　　结果:332例男性不育患者中发现了23例Y染色体微缺失,发生率为6.93％。其中,非梗阻性无精子症患者10例,严重少精子症患者13例;23例微缺失患者中,11例为AZFc区缺失,1例为AZFb区缺失,10例为AZFa区缺失,1例为AZFa+AZFc区缺失;377例已正常生育且精液质量正常的男性对照未检测到Y染色体微缺失。
　　结论:Y染色体长臂微缺失是中国汉族人群男性严重精子发生异常的重要原因之一,因此有必要对非梗阻性无精子症及严重少精子症患者进行 Y染色体微缺失检测。
　　第二部分 TEX15基因单核苷酸多态性对精子发生障碍的影响
　　目的:研究TEX15基因单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms,SNPs)与安徽地区精子发生障碍患者易感性关系,了解这些位点基因型频率、等位基因频率和单体型频率变化与精子发生障碍患者临床特征的相关性,以探讨本地区男性不育患者可能的遗传学发病机制。
　　方法:排除 Y染色体微缺失的患者,实验组选择199例非梗阻性无精子症患者及110例严重少精子症患者,对照组选择377例已正常生育且精液质量正常的男性。利用Sequenom ipex Massarray质谱阵列技术对TEX15基因的9个SNPs位点进行了基因型分型,利用统计学软件对数据资料进行统计学分析。
　　结果:TEX15基因的3个SNPs基因型、等位基因以及单倍型频率在先天性男性不育患者和对照组之间分布存在差异。与正常对照组相比,在显性模式下,rs323346 CT/CC和rs323347 GG/GA基因型显著增加了罹患严重少精子症风险(P=0.021,OR=1.837,95%CI=1.094-3.084;P=0.024,OR=1.814,95%CI=1.08-3.046);rs2343694 GA/AA基因型显著增加了非梗阻性无精子症患者患病风险(P=0.042,OR=1.914,95%CI=1.025-3.575)。这三个多态性位点的单倍型分析发现,与其它单倍型相比,单倍型GTA具有保护精子正常发生的功能(P=0.037,OR=0.685,95%CI=0.479-0.980),且降低严重少精子症患者患病的风险性(P=0.044,OR=0.616,95%CI=0.383-0.990),而单倍型ACG具有增加精子发生障碍危险的趋势(P=0.050,OR=1.701,95%CI=0.994-2.911)。
　　结论:TEX15基因rs323346,rs323347和rs2343694遗传多态性与精子生成障碍患者的发病风险存在关联,rs323346和rs323347显著增加了罹患严重少精子症的风险,rs2343694显著增加了罹患非梗阻性无精子症的风险,这些多态性可能是中国汉族人群精子发生障碍患者的遗传易感因素,但还需要更大样本和功能学研究来进一步证实。

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Y染色体微缺失和TEX15基因单核苷酸多态性对精子发生障碍的影响

引言

第一部分 Y染色体微缺失对精子发生障碍的影响

1.材料与方法

1.1 研究对象

1.2 调查方法

1.3 基因实验试剂

1.5 基因实验方法和步骤

2. 结果

2.1 Y染色体微缺失检测结果

2.2 AZF缺失类型及其睾丸大小，性激素水平

3. 讨论

第二部分 TEX15基因单核甘酸多态性对精子发生障碍的影响

1.材料与方法

1.1 研究对象

1.2 基因实验试剂

1.3 基因实验仪器

1.4 基因实验方法和步骤

1.5 统计学分析

2. 结果

2.1 所研究人群的临床特征

2.2 TEX15基因SNPs与精子发生障碍的关系

2.3 TEX15基因SNPs rs323346, rs323347 和rs2343694多态性与先天性男性不育患者临床特征关系

2.4 单体型分析

2.5 TEX15基因rs323344和rs323345多态性的Meta分析

3. 讨论

第三部分 结语

1. 本课题的创新性和局限性

2. 本课题进一步的研究方向和展望

3. 结语

参考文献

附 录

致谢

综述