氧诱导视网膜病变小鼠模型中SDF-1及VEGF的表达及AMD3100对其的干预

摘要

目的:研究血管内皮生长因子(VEGF)及基质细胞衍生因子-1(SDF-1)在氧诱导的视网膜病变(OIR)模型小鼠视网膜上的表达情况。并探索一种SDF-1的受体拮抗剂对该模型小鼠视网膜新生血管的抑制作用。　　 方法:58只7日龄C57BL/6小鼠,其中29只小鼠作为正常对照组其余为实验组建立OIR动物模型。将小鼠随机分为6组:单纯对照组(n=17),其中P17日龄处死6只用于做视网膜铺片ADP酶染色和石蜡切片HE染色,P19日龄同样处理6只小鼠,另取P19日龄5只小鼠用于Realtime PCR测视网膜上VEGFmRNA和SDF-1mRNA的表达。单纯给氧组(n=17)处理同单纯对照组。其余的小鼠(n=24)根据在玻璃体腔内一次性注射不同浓度的AMD3100,根据给药剂量分为小剂量给药组、大剂量给药组、小剂量安全对照组、大剂量安全对照组(各组n=6,对侧眼玻璃体腔内注射BSS作为自身对照)。各组小鼠P19时行视网膜铺片ADP酶染色、石蜡切片HE染色、抗VEGF及抗SDF-1免疫组化染色,镜下观察结合视网膜平均阳性染色面积百分比(Average Positive Staining Area Percentage,APSAP)进行两两比较,采用t检验。　　 结果:单纯对照组和单纯给氧组视网膜上均有VEGF mRNA和SDF-1 mRNA的表达,且给氧组的表达显著性增高(t=2.488,P=0.038:t=2.864,P=0.021)。给药组的视网膜铺片ADP酶染色和石蜡切片HE染色的表现与自身对照组相比差异明显,更接近于正常对照组。各组视网膜上免疫组织化学切片神经上皮均可见VEGF和SDF-1表达,计算平均阳性染色面积百分比后,给药组(组7、组8)均比自身对照组(组9)显著降低。　　 结论:氧诱导视网膜病变(OIR)模型小鼠的视网膜神经上皮层中VEGF mRNA和SDF-1 mRNA的表达增加。玻璃体腔内注射过SDF-1受体拮抗剂AMD3100的OIR模型小鼠视网膜新生血管生成减少,且视网膜上VEGF和SDF-1的蛋白表达均下降,提示AMD3100通过拮抗SDF-1的受体来减少SDF-1与CXCR4相结合所产生的效应,从而使VEGF的蛋白表达降低,抑制了新生血管生成。