ω-3多不饱和脂肪酸对严重烧伤大鼠心肌损伤保护作用的实验研究

摘要

目的:研究ω-3多不饱和脂肪酸对严重烧伤大鼠心脏功能保护的机理以及心肌细胞超微结构的变化的影响。
　　方法:清洁级成年Sprague Dawley(SD)大鼠72只,雌雄不限,随机分成3组:正常对照组(简称A组,共8只),20％中长链脂肪酸对照组(简称B组,共32只),ω-3多不饱和脂肪酸治疗组(简称C组,共32只)。采用大鼠30%TBSAⅢ度烧伤模型,A组大鼠经尾静脉注射生理盐水2mL/(kg·d),B组每天定时经尾静脉注射20%力能中长链脂肪乳,1mL/(kg·d)。C组在相同时间点经尾静脉注射与B组等氮等热量的尤文ω-3鱼油脂肪乳,2mL/(kg·d)。分别观察伤前(A组)、伤后(B组、C组)1d、4d、7d、10d四个时相点大鼠血清TNF-α、IL-6、肌钙蛋白I(cTnI)水平;透射电镜观察心肌组织形态学改变;免疫组织化学染色法观察心肌组织NF-κBp65的表达结果;RT-PCR检测心肌细胞TNF-αmRNA的表达。每个时相点8只大鼠。
　　结果:1.B、C两组在伤后各时相点血清TNF-α、IL-6水平显著高于伤前(P<0.01)。C组血清TNF-α、IL-6水平较B组降低,在伤后4、7、10 d与B组比较差异有显著性(P<0.05或P<0.01)。2. B、C两组血清cTnI水平在伤后各时相显著高于正常对照组(A组)(P<0.01);在伤后4、7、10 d,C组cTnI水平明显低于B组(P<0.05)。3.透射电镜观察:与A组比较,B组、C组伤后心肌组织肌纤维溶解断裂,线粒体肿胀且有空泡变,嵴突破坏;C组心肌细胞损伤程度明显轻于B组。4.免疫组化提示:与A组比较,B组、C组心肌组织NF-κBp65表达增强;与B组比较,C组心肌组织NF-κBp65表达减弱(P<0.05)。5. B组、C组在伤后各时相点,心肌组织TNF-αmRNA表达较A组明显升高(P<0.01);与B组比较,在伤后4d、7d,C组心肌组织TNF-αmRNA的表达明显降低(P<0.05)。
　　结论:1.ω-3PUFAs减轻烧伤后促炎症介质IL-6、TNF-α的释放;2.ω-3PUFAs可以明显减少心肌组织中NF-κBp65、TNF-αmRNA的表达;3.ω-3PUFAs降低血清cTnI的水平,改善烧伤后心肌细胞的损伤,保护心肌;4.ω-3 PUFAs抗炎机制可能与阻断NF-κB信号通路的激活、减少各种炎症介质的产生有关;并可能通过抑制炎症起到对严重烧伤后大鼠心脏的保护作用。

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1、引 言

2、材料与方法

2.1实验动物模型与分组

2.2 动物模型制备

2.3 主要试剂及仪器

2.4 主要试剂的配制

2.5 标本采集与处理

2.6 标本测定与方法

2.7 统计学处理

3、结 果

3.1 血清肿瘤坏死因子(TNF-α)含量

3.2 血清白细胞介素-6（IL-6）含量

3.3 血清cTnI的检测结果

3.4心肌组织损伤透射电镜观察结果（照片见附录）

3.5 免疫组织化学染色法观察心肌组织NF-κBp65表达的结果（照片见附录）

3.6 心肌组织TNF-αmRNA表达结果

4、讨 论

4.1 心肌损伤的发生机制

4.2 ω-3PUFAs对心肌损伤的保护机制

5、结 论

参考文献

附录

致谢

综述