DLLME法用于猪肉组织及器官中三种四环素类抗生素及其代谢物的测定研究

摘要

分散液液微萃取为近年来发展迅速的样品前处理技术，具有低污染、低成本、高效率、高准确度、操作简单快捷以及方便与各种检测仪器联用等优点[59]，已被广泛应用在化学、生物、药物、环境、食品等领域的分离分析中。　　本文即研究了两种分散液液微萃取模式（IL-DLLME和SO-DLLME）对三种四环素类抗生素（TCs）及其代谢物（TC、OTC、CTC、ETC、EOTC、ECTC）的萃取情况，通过对比，选择最佳萃取模式结合HPLC法对不同猪肉组织及器官进行测定，研究六组分在各组织及器官中的迁移情况。此外，本文采用HPLC法对猪肾中TC、OTC、CTC三种抗生素在不同储存条件下进行检测分析，研究其降解性，主要研究内容如下：　　1、建立了IL-DLLME萃取样品溶液中三种TCs及其代谢物的方法，分别对萃取剂种类，分散剂种类，萃取剂体积，分散剂体积，萃取时间，盐浓度做优化选择，得到最佳萃取条件。在最优条件下分别对浓度为10.0mg·L-1的两种混合标准样品溶液（CTC、ECTC浓度为20.0mg·L-1）进行萃取并经HPLC检测，经计算，三种TCs的富集倍数分别为：TC10.2倍、OTC3.9倍、CTC24.3倍；三种TCs代谢物富集倍数分别为：ETC18.7倍，EOTC10.1倍，ECTC25.2倍。　　2、建立了SO-DLLME萃取样品溶液中三种TCs及其代谢物的方法，分别对溶剂种类，盐浓度，萃取剂体积和萃取时间做优化选择，得到最佳萃取条件。在最优条件下分别对浓度为10.0mg·L-1的两种混合标准样品溶液（CTC、ECTC浓度为20.0mg·L-1）进行萃取并经HPLC检测。经计算，三种TCs的富集倍数分别为：TC8.6倍、OTC14.2倍、CTC2.2倍；三种TCs代谢物富集倍数分别为：EATC11.1倍，EOTC10.7倍，ECTC7.1倍。　　3、采用IL-DLLME-HPLC方法测定猪肉组织中三种TCs及其代谢物。在优化后的IL-DLLME条件下进行萃取并进样分析。结果表明：六种组分在浓度为0.02～2.0mg·L-1之间（CTC、ECTC浓度为0.04～4.0mg·L-1）有良好的线性关系，相关性系数（r2）均大于0.99；样品加标回收率在79.2~107.5%之间；检出限（LOD）在0.007～0.023mg·L-1之间；相对标准偏差（RSD）均小于5%（n=11）。该方法能很好地将六种性质非常相似的待测组分分离，并具有较高的精密度和较低检出限，对其在猪肉组织及器官中含量的迁移研究，可为TCs在动物体内的药代动力学提供参考。　　4、采用HPLC法研究猪肾样品中OTC、TC和CTC在不同储存条件下（不同储存时间、温度及添加不同防腐剂等）的降解性，结果表明：①在相同的储存温度条件下，随着储存时间增长，猪肾样品中的OTC、TC和CTC的降解性就越高；②在相同的储存时间条件下，随着温度升高，猪肾样品中OTC、TC和CTC的剩余率不断地减少，降解性越来越高；③猪肾样品中的OTC、TC和CTC在相同的储存条件下添加苯甲酸防腐剂、山梨酸防腐剂、亚硝酸钠防腐剂的降解性均比没有添加防腐剂的降解性低；④添加亚硝酸钠防腐剂和山梨酸防腐剂冷藏保存的样品比添加苯甲酸防腐剂冷藏保存的样品的降解性低。

目录

声明

第一章 绪论

1.1 抗生素概述

1.2 分散液-液微萃取（DLLME）技术

1.3 盐析（SO）技术

1.4 离子液体（IL）概述

1.5本文研究内容

第二章 DLLME对三种TCs及其代谢物的萃取模式的选择

2.1 前言

2.2 实验部分

2.3 DLLME技术用于三种TCs及其代谢物的萃取研究

2.4 小结

第三章 猪肉组织中三种TCs及其代谢物残留量的检测及其迁移情况研究

3.1 前言

3.2 实验部分

3.3 结果与讨论

3.4 小结

第四章 猪肾中三种TCs在不同储存条件下的降解性研究

4.1 前言

4.2 实验部分

4.3 结果与讨论

4.4 小结

第五章 结论与展望

5.1 结论

5.2 展望

参考文献

致谢

附录：硕士期间论文发表情况