羟氯喹对CpG-ODN诱导的浆细胞样树突状细胞活化的影响

摘要

目的：探讨羟氯喹(HCQ)对CpG-ODN诱导的pDCs活化及TLR样受体9及髓样分化因子88信号通路的影响,了解羟氯喹治疗系统性红斑狼疮的作用机制。
　　方法：收集10例系统性红斑狼疮患者外周全血,EDTA抗凝,密度梯度离心分离得外周血单个核细胞(PBMC),1640培养基中培养,加入寡脱氧核苷酸(CpG-ODN)2216刺激,加入HCQ共培养,24h后收集PBMC,RT-PCR测PBMC中TLR-9和MyD88 mRNA表达水平;产房收集脐带血36份,每次实验用脐带血250ml-300ml,密度梯度离心得脐带血单核细胞,BDCA-4磁珠分选得前体pDCs细胞,前体pDCs分为3组(IL-3,IL-3+CpG, IL-3+CpG+HCQ)培养3天,流式细胞术测各组pDCs表面BDCA-2、CD86、CD32表达,ELISA检测上清细胞因子IFN-α水平。
　　结果：①CpG+HCQ组PBMC中TLR-9mRNA和MyD88mRNA表达水平显著低于CpG组(P<0.05);②IL-3+CpG组BDCA-2表达水平和平均荧光强度显著低于IL-3组(P<0.05);③ IL-3+CpG组CD32和CD86表达水平和平均荧光强度显著高于IL-3组(P<0.05)。④ IL-3+CpG组培养上清IFN-α浓度显著高于IL-3组(P<0.05)。⑤ IL-3+CpG+HCQ组CD32表达水平和荧光强度均显著低于IL-3+CpG组(P<0.05);培养上清IFN-α浓度显著低于 IL-3+CpG组(P<0.05)。⑥与IL-3+CpG组相比,IL-3+CpG+HCQ组BDCA-2和CD86表达水平和平均荧光强度均有升高趋势,但差异无统计学意义(P>0.05)。
　　结论:HCQ通过抑制pDC表面CD32表达,抑制下游信号TLR9和MyD88传导,抑制CpG-ODN诱导的pDCs活化,减少IFN-α的分泌。HCQ抑制pDCs活化可能是其治疗SLE的重要机制。

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英文缩略词表

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英文摘要

1.前言

2．材料和方法

2.1 材料

2.2实验方法：

2.3 统计学处理

3. 结果

3.1体外培养PBMC中TLR9/MyD88mRNA表达水平

4.讨论：

5.不足之处

6. 结论

参考文献

附 录

致谢

综 述