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COX-2、tM2-PK在结直肠癌患者血清与组织中的表达及其临床意义

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1前言

2 实验材料与方法

2.1 标本收集

2.2 一般资料

2.3 主要试剂

2.4 主要仪器

2.5切片的制作

3实验原理与方法

3.1免疫组织化学技术法原理

3.2免疫组化S-P法主要实验步骤

3.3 ELISA法的基本原理

3.4 ELISA试验主要步骤

3.5结果判断

3.6 数据处理

4 结果

4.1 血清COX-2的表达水平

4.2 组织COX-2的表达水平

4.3 血清实验组与组织实验组COX-2表达的相关性

4.4 血清tM2-PK的表达水平

4.5 组织tM2-PK的表达水平

4.6 血清实验组M2-PK与组织实验组M2-PK表达的相关性

4.7 血清实验组COX-2与血清实验组tM2-PK表达的相关性

4.8组织实验组COX-2与组织实验组tM2-PK表达的相关性

5 讨论

5.1 COX-2在结直肠癌中的表达

5.2 结直肠癌tM2-PK的表达

5.3 结直肠癌患者COX-2和tM2-PK的表达相关性

参考文献

附录

致谢

综述

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摘要

目的:分别检测结直肠癌患者血清与肿瘤组织中环氧合酶-2(Cylooxygenase-2,COX-2)、肿瘤型丙酮酸激酶( tumor M2 pyruvate kinase,tM2-PK)的表达水平,探讨它们在结直肠癌中表达、相关性以及发生发展过程中的作用,进而为结直肠癌的诊断、预后判断及指导治疗提供新的途径。
  方法:
  1.收集68例结直肠癌患者术前血清、术后癌组织标本分别作为血清实验组和组织实验组,40例健康体检者血清作为血清对照组,68例结直肠正常组织(距癌组织边缘大于5CM以上)作为组织对照组,分别采用免疫组织化学(IHC)和酶联免疫吸附(ELISA)方法检测组织与血清中COX-2和tM2-PK的表达水平。
  2.分析COX-2和tM2-PK的表达水平与临床病理特征的关系、两者之间的相关性,以及两者表达对结直肠癌的诊断,以及与患者预后的关系。
  3.采用SPSS13.0统计软件进行分析。
  结果:
  1.血清COX-2的表达水平血清实验组COX-2水平为(16.12±7.17)μg/L,明显高于血清对照组(5.89±3.12)μg/L,二者比较差异有统计学意义( P<0.05);血清实验组COX-2阳性表达率为64.7%(44/68),明显高于血清对照组5%(2/40),二者比较差异有统计学意义( P<0.05)。结直肠癌患者血清COX-2的阳性表达水平与Dukes临床分期密切相关(P<0.05),而与性别、年龄、肿瘤部位、肿瘤大小、分化程度等生物学行为无明显相关性(P>0.05)。
  2.组织COX-2的表达水平实验结直肠癌组织中COX-2阳性表达51例,阳性表达率为75.0%(51/68),癌旁正常组织COX-2阳性表达10例,阳性表达率为14.9%(10/68),结直肠癌组织中COX-2阳性表达率明显高于癌旁正常组织组,经卡方检验,差异有统计学意义(P<0.05)。组织COX-2的表达水平与Dukes临床分期密切相关(P<0.05),而与性别、年龄、肿瘤大小、肿瘤部位、分化程度无明显相关性(P>0.05)。
  3.血清实验组 COX-2与组织实验组 COX-2表达的相关性结直肠癌患者血清COX-2与肿瘤组织COX-2的表达呈正相关(χ2=5.495,r=0.284, P=0.019);
  4.血清tM2-PK的表达水平结直肠癌患者血清tM2-PK水平(28.78±10.04)μ/ml明显高于正常组(11.15±5.81)μ/ml(P值<0.05),血清实验组tM2-PK阳性表达率为67.6%(46/68),明显高于血清对照组15%(6/40),二者比较差异有统计学意义(P<0.05);结直肠癌患者血清M2-PK阳性表达与肿瘤大小、Dukes临床分期密切相关(P<0.05),而与年龄、性别、肿瘤部位及分化程度无关(P>0.05);68例结直肠患者血清中,其敏感性为67.6%(46/68),特异性为85.0%(34/40)。
  5.组织tM2-PK的表达水平实验结直肠癌组织中tM2-PK阳性表达56例,阳性表达率为82.4%(56/68),癌旁正常组织 tM2-PK阳性表达25例,阳性表达率为36.8%,(25/68);结直肠癌组织中tM2-PK阳性表达率明显高于癌旁正常组织组,经卡方检验,差异均有统计学意义(χ2=21.823,P=0.000)。结直肠癌组织中M2-PK阳性表达与肿瘤大小、Dukes临床分期及分化程度密切相关(P<0.05),而与年龄、肿瘤部位无关(P>0.05)。
  6.血清实验组 tM2-PK与组织实验组 tM2-PK表达的相关性结直肠癌患者血清tM2-PK水平与肿瘤组织中tM2-PK的表达呈正相关(χ2=5.459,P=0.019,r=0.283)7.组织实验组COX-2与组织实验组tM2-PK表达的相关性结直肠癌组织COX-2表达与肿瘤组织tM2-PK的表达呈正相关(χ2=5.278,P=0.022,r=0.279)。
  8.血清实验组COX-2与血清实验组tM2-PK表达的相关性比较68例结直肠癌患者术前血清中COX-2与tM2-PK含量之间的相关性(χ2=3.293,P=0.048,r=0.240)
  结论:
  1.结直肠癌患者血清和组织中 COX-2水平均升高且具明显的相关性,与结直肠癌的发生发展密切相关,通过检测血清COX-2水平可以反映癌组织COX-2水平,检测COX-2水平可为结直肠癌的诊断、治疗提供一定的理论基础。
  2.结直肠癌患者血清和组织中 tM2-PK水平均升高且具明显的相关性,通过检测血清tM2-PK水平可以反映癌组织tM2-PK水平,都与结直肠癌的肿瘤大小、Dukes临床分期相关,提示tM2-PK可能成为诊断和监测结直肠癌发生发展,评估预后的血清标志物。
  3.结直肠癌组织中中COX-2与tM2-PK水平均升高,表达呈显著性正相关,提示它们可能在结直肠癌的发生发展过程中起到协同作用。
  4.结直肠癌患者术前血清COX-2与tM2-PK之间存在正相关性,表明COX-2与tM2-PK在结直肠癌的发生发展中可能具有协同作用,联合检测两者的血清中浓度可能为结直肠癌的诊断提供新的生物学依据。

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