单吻合口袖状胃切除联合十二指肠空肠旁路术在2型糖尿病大鼠模型中降糖、减重的研究

摘要

我国20岁以上的人群糖尿病总体患病率为9.7％，患病总数高达9240万，位居世界第一，其中2型糖尿病(Type2 diabetic mellitus，T2DM)占90％。T2DM作为一种传统的内科疾病，近年来最引入注目的治疗进展就是纳入了外科手术，美国糖尿病协会达成共识，将胃旁路手术(Roux-en-Y gastric bypass，RYGB)作为T2DM的治疗选择之一。袖状胃切除术(sleeve gastrectomy，SG)作为一种新型独立的减重手术，因其手术难度低，并发症少，在世界范围内得到了越来越多的应用。然而随着SG数量的增加，越来越多的外科医生关注SG的视角由减重转向其作为“代谢手术”的效果并对比其与“金标准”的RYGB在缓解T2DM疗效的差异，SG的效果并不完美。因此越来越多的外科医生选在一期手术时即对SG附加旁路成分。　　单吻合口袖状胃切除结合十二指肠-空肠旁路手术(Single-AnastomosisDuodenal-Jejunal Bypass with Sleeve Gastrectomy，SADJB-SG)在2013年首次由亚洲的外科医生所提出，SADJB-SG在短期的随访中，减重和缓解糖尿病的效果稳定，并且具有以下优点:(1)与RYGB相比，SADJB-SG避免了残胃癌的发生。(2) SADJB-SG可以认为是一种简化了的胆胰分流/十二指肠转位(biliopancreaticdiversion with duodenal switch，BPD/DS)，同时兼顾了袖状胃切除的优势和“前肠理论”和“后肠理论”。(3) RYGB和BPD/DS的不过术式均有两个吻合口，而SADJB-SG在保证基本原理不便的情况下减少了一个吻合口，这对手术操作难度、术后恢复以及并发症的发生均有提高。　　本研究拟建立一个安全可靠的SADJB-SG大鼠模型，并且在次模型的基础上进一步观察其减重及缓解T2DM的效果，初步探索SADJB-SG术后ghrelin和GLP-1等胃肠道激素的变化。　　第一部分单吻合口袖状胃切除联合十二指肠空肠旁路术在肥胖型T2DM大鼠模型中的建立　　研究目的：在SG大鼠模型的基础上建立一个安全可靠的SADJB-SG大鼠模型，并且选择屈氏韧带下10cm、20cm和30cm处行十二指肠空肠吻合。　　材料和方法：100只6周龄清洁级Sqrague-Dawley大鼠（SD大鼠），体重150-180g，平均体质量173.66±13.73g，随机分为普通饲料组20只（NF组），平均体质量174.98±14.36g，高脂高糖饲料组80只（HF组），平均体质量173.33±13.164g，两组无统计学差异(p＞0.05）。所有大鼠饲养8周，HF组中体重大于NF组体重20％者定义为肥胖大鼠，最终HF组共70只达到体质量要求。达到体质量要求的HF组大鼠经腹腔一次性注射链脲佐菌素溶液(STZ)45mg/kg，注射3天后经尾静脉测定血糖，连续三天内平均血糖大于16.70mmol/L者为造模成功者，最终共61只大鼠达到模型要求，造模成功率76.25％。排除手术死亡大鼠后共分为以下5组:空白对照组（S0组）10只，SG组10只，SADJB-SG组30只，后根据十二指肠的吻合位置又分为SA10组（吻合口位于屈氏韧带下10cm）10只，SA20组10只，SA30组10只。　　结果： SG组大鼠共行手术12只，死亡2只，存活率为83.33％。SADJB-SG手术大鼠39只，死亡9只大鼠，手术存活率为76.92％。SG组、SA10组、SA20组和SA30组的手术时间分为别52.4±5.44分钟，69.2±5.41分钟，68.7±5.74分钟和68.2±5.55分钟，SG组的手术时间小于SADJB-SG各组的手术时间，具有统计学意义(p＜0.05）。　　结论：本研究成功建立了肥胖型T2DM大鼠模型和SADJB-SG大鼠模型，并且可以在次基础上进一步研究相关术式缓解肥胖和T2DM的效果。　　第二部分单吻合口袖状胃切除联合十二指肠空肠旁路术缓解肥胖型2型糖尿病大鼠的研究　　研究目的：探索SADJB-SG缓解肥胖型T2DM大鼠的效果。　　材料和方法：6周龄清洁级Sqrague-Dawley大鼠（SD大鼠），经过高脂高糖饲料喂养8周+一次性腹腔注射STZ溶液(45mg/kg)诱导为T2DM大鼠后共分为以下5组:空白对照组(S0组)10只，SG组10只，SADJB-SG组30只，后根据十二指肠的吻合位置又分为SA10组(吻合口位于屈氏韧带下10em)10只，SA20组10只，SA30组10只。通过OGTT检测大鼠空腹及餐后血糖和胰岛素，判断糖尿病缓解情况。通过高葡萄糖钳夹技术和正葡萄糖高胰岛素钳夹技术判断大鼠胰岛β细胞的功能和胰岛素敏感性。　　结果： SG和SADJB-SG均可有效降低大鼠的空腹血糖和空腹胰岛素，以及OGTT血糖和胰岛素的曲线下面积。两者均可有效增加大鼠第一时相胰岛素分泌和第二时相胰岛素分泌，增加葡萄糖输注率，胰岛素敏感性指数明显增加，但SG和SADJB-SG之间差异不大。　　结论： SG和SADJB-SG都可以显著降低T2DM大鼠的空腹血糖和空腹胰岛素水平，降低血糖和胰岛素的曲线下面积，改善胰岛素抵抗和胰岛素敏感性，增加第一时相和第二时相的胰岛素分泌。　　第三部分单吻合口袖状胃切除联合十二指肠空肠旁路术缓解肥胖和2型糖尿病机制的研究　　研究目的：通过检测SADJB-SG术后血清ghrelin和GLP-1的变化，研究SADJB-SG缓解肥胖型T2DM可能的机制。　　材料和方法：6周龄清洁级Sqrague-Dawley大鼠（SD大鼠），经过高脂高糖饲料喂养8周+一次性腹腔注射STZ溶液(45mg/kg)诱导为T2DM大鼠后共分为以下5组:空白对照组（S0组）10只，SG组10只，SADJB-SG组30只，后根据十二指肠的吻合位置又分为SA10组（吻合口位于屈氏韧带下10cm）10只，SA20组10只，SA30组10只。在实验第一天（大鼠6周龄）、术前3天和术后8周检测空腹血清total ghrelin(TG)和Acylated ghrelin(AG)，在术前3天和术后8周检测空腹、灌胃30分钟、60分钟和90分钟的血清GLP-1值。　　结果肥胖大鼠具有更低的血清TG值，但AG不变，AG/TG增高，SG和SADJB-SG可以进一步降低血清TG值，AG仍不变，AG/TG进一步增高。SADJB-SG可增加空腹和灌胃后的GLP-1浓度，尤其是灌胃后30分钟，SA30组具有最高的30分钟GLP-1浓度。　　结论： SG和SADJB-SG均可以有效降低大鼠血清空腹TG浓度，但并不改变AG浓度，而AG/TG的比例进一步增高。SADJB-SG可以增加血清空腹GLP-1浓度，SG和SADJB-SG都可以明显增高灌胃30分钟后的GLP-1浓度，但后者增加幅度更大，且随着吻合口位置的增加，SADJB-SG对GLP-1的影响更大。

目录

声明

摘要

英文缩略词表

第一部分 单吻合口袖状胃切除联合十二指肠空肠旁路术在肥胖型T2DM大鼠模型中的建立

(二)实验器械及设备

(三)药物及试剂

三、方法

四、检测指标及结果

五、讨论

六、结论

参考文献

第二部分 单吻合口袖状胃切除联合十二指肠空肠旁路术缓解肥胖型2型糖尿病大鼠的研究

(二)实验器械及设备

(三)药物及试剂

(三)取血方法

(四)检测方法

(五)观察及检测指标

(六)统计学方法

四、结果

五、讨论

六、结论

参考文献

第三部分 单吻合口袖状胃切除联合十二指肠空肠旁路术缓解肥胖和2型糖尿病机制的研究

二、材料

三、方法

四、结果

(一)ghrelin的变化

(二)GLP-1的变化

五、讨论

六、结论

参考文献

全文小结

袖状胃切除术治疗Ⅱ型糖尿病的进展

攻读硕士期间发表论文

致谢