唑来膦酸在预防兔激素性股骨头坏死中对NPY、BGP与TRACP-5b表达的影响

摘要

目的:本研究通过制造激素联合内毒素致兔股骨头坏死模型,采用唑来膦酸进行干预,探讨唑来膦酸在预防兔激素性股骨头坏死中对NPY、BGP与TRACP-5b表达的影响,从而为唑来膦酸预防激素性股骨头坏死的作用通路提供理论支持。
　　方法:选取70只28周龄雄性新西兰大白兔,先以兔维持饲料实验性喂养7天。然后按照随机对照原则分为3组,3组动物体重差异无统计学意义。唑来膦酸组(A组):共30只,经耳缘静脉注射1次LPS(大肠杆菌内毒素,10μg/kg),臀肌注射MPS(注射用甲泼尼龙琥珀酸钠,20mg/kg),共3次,注射的时间间隔为24小时,末次使用MPS后24小时开始经耳缘静脉注射唑来膦酸注射液,100μg/kg,共2次,时间间隔4周。模型组(B组):共30只,与A组在同一时间点、相同部位经相同途径注射相同剂量的LPS与MPS,由生理盐水代替唑来膦酸注射液。空白对照组(C组):共10只,与A组在同一时间点、相同部位经相同途径注射相同剂量的生理盐水,唑来膦酸注射液由生理盐水替代。观察动物的一般情况、死亡率并行及时抢救、补充实验动物等。A组和B组中的每只动物均被从耳缘静脉抽取5次血,具体抽血时间如下:耳缘静脉注射LPS前3天、注射MPS后1周、2周、4周及6周。C组也在相同时间点进行抽血。ELISA法检测不同时间点血清中NPY、BGP和TRACP-5b的表达水平。使用SPSS17.0软件对ELISA的检测结果进行统计学分析。组内自身前后对照比较及组间相同时间点比较采用单因素方差分析。第6周末,所有动物均在全身麻醉下行X线放射学检查与MRI扫描,并经MRI扫描评估股骨头坏死情况。经耳缘静脉空气栓塞处死动物,取出股骨头,观察其形态、色泽及软骨下骨外露情况等。行组织病理学检查,评估空骨陷窝的发生率及股骨头坏死的发生率。
　　结果:第6周末,A组和B组两组动物的死亡率分别为16.67％、20.00%。MRI扫描发现,A组和B组股骨头坏死率分别为10.00%、60.00%。A组自身前后对照比较:血清NPY水平逐渐降低;血清BGP水平逐渐下降;血清TRACP-5b水平逐渐升高,差异均有统计学意义。B组自身前后对照比较:血清NPY水平明显降低;血清BGP水平明显下降;血清TRACP-5b水平明显升高,差异均有统计学意义。C组自身前后对照比较:血清NPY、BGP和TRACP-5b的水平虽略有波动,但均无统计学差异。A、B、C三组在相同时间点进行组间两两比较,差异均有统计学意义,B组中血清NPY、BGP水平最低且TRACP-5b水平最高,紧随其后的是A组和C组。HE染色发现,A、B两组空骨陷窝发生率(%)分别为44.25±18.74、61.75±13.59;A、B两组的股骨头坏死率(%)分别为16.67、76.67。
　　结论:
　　1.本实验证实唑来膦酸对激素性股骨头坏死的预防是通过上调血清中BGP与NPY的浓度水平,下调TRACP-5b的浓度水平实现的;
　　2.MRI在诊断激素性股骨头坏死方面特异性强,敏感度高,与组织病理学检查相比具有高度一致性,可用于股骨头坏死的药物预防效果评估、早期诊断与判断预后。

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缩略词表

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1 前言

2 材料与方法

2.1 实验仪器与试剂

2.2 实验动物及其分组

2.3 研究方法和研究内容

3 结果

3.1 普通观察与特殊处理

3.2 血清学指标

3.3 影像学检查

3.4 股骨头大体观察

3.5 HE染色

4 讨论

4.1 NPY、BGP及TRACP-5b与骨代谢

4.2 唑来膦酸拮抗GC对骨代谢的负性调节

4.3 NPY、BGP、TRACP-5b与唑来膦酸对SANFH的预防作用

4.6 MRI与组织病理学检查在诊断早期SANFH的准确性比较

4.7 本实验动物死亡率与股骨头坏死率分析

4.8问题与展望

5 结论

参考文献

本人简历

致谢

神经肽Y对骨代谢调节的研究进展