转录因子Ets-1及B细胞异常在系统性红斑狼疮发病机制中的相关性研究

摘要

目的：探讨转录因子ETS-1及B淋巴细胞相关细胞因子对系统性红斑狼疮(SLE)患者B细胞分化的影响,从而揭示ETS-1在SLE发病机制中的作用及与临床特征的关系。
　　方法：选取安徽省立医院风湿免疫科门诊及住院SLE患者31例,均符合美国风湿病学会2009年修订的SLE分类诊断标准。其中29例为女性,2例为男性,年龄16～55岁,平均(33.77±11.21)岁,排除感染、肿瘤及其他自身免疫病。其中活动期20例(SLEDAI评分>5分),稳定期11例(SLEDAI评分≤5分)。15例正常对照,其中14例为女性,1例为男性,年龄23～32岁,平均(30.33±3.87)岁。两组在年龄及性别构成方面差异无统计学意义。
　　分离SLE患者和正常对照外周血单核细胞(PBMC),采用流式细胞术检测PBMC中CD19-CD138+浆细胞与CD19+B细胞比值的变化;并利用磁珠分选技术获得CD19+B细胞;应用实时荧光定量PCR技术检测B细胞ETS-1mRNA表达;采集SLE患者和正常人的血清,存贮于-80℃冰箱,统一检测。采用ELISA法检测血清中B细胞分化相关细胞因子APRIL、IL-10水平,具体操作严格按照试剂说明书进行。分析CD19-CD138+/CD19+细胞比值、不同分组SLE患者B细胞ETS-1mRNA的表达量、临床指标及实验室指标的相关性。
　　结果：①SLE组与正常对照组相比B细胞ETS-1mRNA的表达水平显著下降(Z=-4.218,P<0.01);②SLE组与正常对照组相比CD19+B细胞比例下降((4.67±2.55)％vs(6.8±2.23)%,P=0.008)、CD19-CD138+浆细胞比例((0.41±0.3)%vs(0.2±0.18)%,P=0.02)及CD19-CD138+B细胞/CD19+浆细胞比值((0.13±0.1)%vs(0.03±0.02)%,P<0.01)均明显上升,差异有统计学意义;③SLE组ETS-1mRNA表达水平与CD19-CD138+浆细胞比例呈负相关(r=-0.359,P=0.047),与CD19-CD138+/CD19+细胞比值也呈负相关(r=-0.493,P=0.005),正常对照组ETS-1mRNA表达水平与CD19-CD138+浆细胞比例、CD19-CD138+/CD19+细胞比值无明显相关性;④活动期SLE患者血清中IL-10((8.36±4.02)pg/mlvs(4.63±4.73)pg/ml,P=0.027)及APRIL水平((49.45±21.15)ng/mlvs(34.90±12.97)ng/ml,P=0.047)显著高于稳定组,与CD19+B细胞无显著相关性,与CD19-CD138+浆细胞(r=0.388,P=0.031;r=0.407,P=0.023)及CD19-CD138+/CD19+细胞比值(r=0.423,P=0.018;r=0.417,P=0.02)呈正相关;⑤SLE活动组患者B细胞ETS-1mRNA的表达量与血清中IL-10(r=-0.779,P<0.01)及APRIL水平(r=-0.576,P=0.008)呈显著负相关,而SLE稳定组则无明显相关性;⑥SLE组ETS-1mRNA表达水平与ANA滴度呈显著负相关(r=-0.376,P=0.041)。
　　结论：ETS-1可能通过影响B细胞分化、并与APRIL、IL-10等B细胞分化相关细胞因子协同参与SLE的发病。

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1.前言

2．材料和方法

2.1 材料

2.2 方法

2.3 统计学处理

2.4 质量控制

3. 结果

3.1 SLE组与正常对照组B细胞ETS-1 mRNA的表达量比较

3.2 SLE组与正常对照组B淋巴细胞亚群比例的比较

3.3 ETS-1 mRNA与CD19-CD138+浆细胞比例及CD19-CD138+/CD19+的相关性

3.4 SLE患者血清中IL-10、APRIL表达水平及其与B细胞亚群比值的相关性

4. 讨论

5. 结论

6. 展望

参考文献

附 录

致谢

综 述