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葡萄柚精油吸嗅对DXM肥胖模型小鼠体重影响的实验研究

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引言

第一部分 葡萄柚精油的GC-MS成分分析研究

1 材料与试剂

2 方法

3 实验结果

第二部分 肥胖小鼠模型的建立

1 实验材料

2 实验方法

3 实验结果

第三部分 模型鼠葡萄柚精油吸嗅后的体重变化及作用机制

1 实验材料

2 实验方法

3 实验结果

讨论

1 DXM造模

2 精油吸嗅和嗅觉通路

3 GC-MS法与精油质控

4 D-柠檬烯功效探索

5 下丘脑关于食欲/能量相关的中枢作用机制探索

6 小结

结论

创新点

不足之处

继续研究方向

参考文献

附 录

致谢

综述

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摘要

研究目的
  肥胖已成为一项全球性的社会问题。面对现如今减肥困难,减肥药效果有限兼且副作用大的情况,设计一种新型,有效,且毒副作用小的减肥方法就势在必行。本实验研究主要目的是试图选择某一芳香物质(嗅质),通过吸嗅,经嗅觉通路投射到下丘脑摄食/能量调节中枢,通过受体表达从而发挥对肥胖小鼠的摄食行为及体重的调控或干预,继而达到减肥的目的。
  研究方法
  通过查阅相关文献,选择属于柑橘属精油的葡萄柚精油作为实验嗅质(odorants)。首先,用GC-MS对该精油进行成分分析,进样浓度分为2%和5%(溶于正己烷中)两种,这一步操作为求得到其中的主要成分组成,并为下一步进行单体吸嗅实验以确定主要有效成分做准备。其次,将72只成年雄性C57BL/6小鼠(体重在25g-26g之间)随机分为三组,空白组,高脂高糖组,DXM组。空白组给予正常饲料,高脂高糖组给予高脂高糖特制饲料,DXM组每间隔72h腹腔注射一次地塞米松注射液,每次0.5ml,历时60d,记录下实验前后体重数据。再次,因高脂高糖组造模失败弃之不用,使用造模成功的DXM组24只小鼠再随机分为2组,空白吸嗅组和精油吸嗅组,空白吸嗅组采用空白吸嗅干预,精油吸嗅组采用葡萄柚精油吸嗅干预,为时30d,记录下实验前后体重数据。最后,所有实验数据采用t检验进行统计学处理,以α=0.05为显著性标准。
  研究结果
  1.GC-MS对精油成分分析的结果是,在2%浓度下,仅得到一种成分,为(R)-cyclohexene,1-methyl-5-(1-methyllethenyl);在5%浓度下,该精油共测得7种成分,分别为:(1)(R)-cyclohexene,1-methyl-5-(1-methyllethenyl)(D-柠檬烯)(2)1,6-octadien-3-ol,3,7-dimethyl(3)trans-p-mentha-2,8-dienol(4)cis-limoneneoxide(5)trans-limoneneoxide(6)(R)-3-hydroxybutyricacid(7)(R)-2-cyclohexen-1-one-2-methyl-5-(1-methylethenyl),其中以第一种相对成分最高,达到97.56%。
  2.造模实验结果是,与空白组相比,高脂高糖组体重在60d内没有上升,反而相对下降,因此造模失败;而DXM组体重上升,且与空白组相比,差异具有统计学意义(α<0.05),因此造模成功。
  3.吸嗅实验结果是,空白吸嗅组在30d内体重仍旧缓慢上升,而精油吸嗅组体重已经下降,且与空白吸嗅组相比,差异具有统计学意义(α<0.05),证实葡萄柚精油吸嗅确对控制食欲、调节体重有效。
  研究结论
  1.葡萄柚精油中可能存在某种活性物质对体重调控有一定影响,本实验中可能为其主要成分D-柠檬烯;
  2.使用腹腔注射DXM法造肥胖小鼠模型可行,可能新增一种新的造模方式;
  3.发现肥胖模型小鼠通过嗅觉通路吸嗅葡萄柚精油可以达到减轻体重的效果,提示嗅觉通路可作为靶点,提供一条有效的道路。

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