MicroRNA-149-3p在皮肤恶性黑素瘤中的表达意义及其与GSK-3α和Mcl-1相关性

摘要

背景:皮肤恶性黑素瘤(Cutaneous malignant melanocytes,CMM)占皮肤肿瘤的4％,但其导致死亡却占皮肤肿瘤死亡的70%以上[1]。全球范围内恶性黑素瘤发病率每10年-20年会增加1倍[2]。皮肤恶性黑素瘤发病较隐匿,早期易误诊或漏诊,发生转移也较其他皮肤肿瘤早,是最致命的皮肤肿瘤之一,严重影响患者生命健康。恶性黑素瘤发生发展机制十分复杂,可能与遗传、环境、免疫等众多因素有关,尤其是遗传相关因素正日益得到研究者的重视。大量研究表明,MicroRNAs的异常表达与在恶性黑素瘤的多种生物学特性有这密切的关系。MicroRNAs是一类广泛存在于真核生物中的单链非编码小分子RNA,在调节基因表达,维持细胞分化以及控制细胞周期中起着重要作用。越来越多的研究表明,MicroRNAs的异常表达对多种肿瘤的发生发展都有重要的影响[3]。近年来,与黑素瘤相关的MicroRNAs不断被发现[4-5]。其中我国学者在体外中发现一条p53–miR-149-3p–GSK3α–Mcl-1信号通路,在黑素瘤细胞的凋亡中扮演重要的角色[6]。
　　目的:比较miR-149-3p在皮肤恶性黑素瘤组织中和良性痣细胞痣的表达差异;分析miR-149-3p的表达与恶性黑素瘤Clark分级、NTM分期、淋巴结转移情况等临床病理特征之间的关系;分析miR-149-3p的表达与恶性黑素瘤患者生存期的关系;分析miR-149-3p、GSK3α和Mcl-1在皮肤恶性黑素瘤中的表达之间的相关性,探讨p53–miR-149-3p–GSK3α–Mcl-1通路在皮肤恶性黑素瘤发生、发展中临床意义。
　　方法:收集安徽医科大学附属医院和上海市皮肤病医院皮肤恶性黑素瘤石蜡组织标本89例,良性痣细胞痣石蜡组织标本19例,应用原位杂交法检测两组病变组织标本中miR-149-3p表达差异;运用免疫组化法检测89例皮肤恶性黑素瘤石蜡组织中GSK3α和Mcl-1蛋白的表达。观察其与miR-149-3p表达的相关性。
　　结果:(1)miR-149-3p在皮肤黑素瘤组织中阳性率为68.5%,在痣细胞痣组织中阳性率为26.3%,两者差异有统计学意义(P<0.05);(2)miR-149-3p在皮肤恶性黑素瘤中Clark分级Ⅰ~Ⅲ级中阳性率为50.0%,Ⅳ~Ⅴ级中阳性率为76.7%(33/43),明显高于前者,差异具有统计学意义(P<0.05);TNM分期Ⅰ~ⅢA期miR-149-3p阳性率为52.1%(25/48),ⅢB~Ⅴ期阳性率为75.6%3(31/41),明显高于Ⅰ~ⅢA期,差异具有统计学意义(P<0.05);伴有远处淋巴结转移者miR-149-3p阳性率为81.0%(17/21)。无远处淋巴结转移者miR-149-3p阳性率为74.4%(39/68),差异无明显统计学意义(P=0.05)。(3)miR-149-3p表达阳性的患者总生存期为42.7～67.4个月,中位生存期为61.3个月,5年生存率为73.2%。miR-149-3p表达阴性的患者总生存期为44.5~69.8个月,中位生存期为63.7个月,5年生存率为87.0%。miR-149-3p表达阳性的患者总生存期略高于miR-149-3p表达阴性的患者,P>0.05无统计学意义。(4)皮肤黑素瘤组织中miR-149-3p与GSK3α的表达、GSK3α与Mcl-1的表达均呈明显负相关性。提示p53–miR-149-3p–GSK3α–Mcl-1对黑素瘤的发生发展具有重要的临床意义。
　　结论 miR-149-3p在皮肤恶性黑素瘤中呈高表达,可能成为黑素瘤的一种潜在标志物。miR-149-3p高表达时,恶性黑素瘤具有更强的侵袭性和转移性。但尚不能对miR-149-3p的表达与黑素瘤患者预后作出明确的结论,有待于进一步研究。恶性黑素瘤中p53–miR-149-3p–GSK3α–Mcl-1通路对其发生发展有重要的临床意义。

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1前言

2. 材料与方法

2.1 石蜡切片组织来源

2.2 仪器设备

2.3 主要试剂

2.4 原位杂交

2.5 免疫组化

2.6 结果判断

2.7 统计方法

3 结果

3.1 miR-149-3p在皮肤黑素瘤组织和痣细胞痣组织中的表达

3.2 miR-149-3p的表达与与黑素瘤临床病理因素之间的关系

3.3 miR-149-3p的表达与患者5年生存率之间的关系

3.4 miR-149-3p、GSK-3α和Mcl-1在人黑素瘤组织中的表达及相关性

4 讨论

5 结论

参考文献

附录

攻读硕士学位期间发表的论文

致谢

综述

参考文献