经皮三叉神经慢性电刺激对慢性癫痫大鼠海马和皮层内VGLUT1与VGAT表达的影响

摘要

目的：
　　观察经皮三叉神经慢性电刺激(trigeminal nerve chronic stimulation,TCNS)对匹罗卡品诱导的慢性癫痫大鼠海马和皮层内囊泡型谷氨酸转运体-1(vesicular glutamate transporter1,VGLUT1)与囊泡型γ-氨基丁酸转运体(vesicular GABA transporter,VGAT)表达的影响,探讨三叉神经电刺激治疗癫痫的可能机制。
　　方法：
　　选用成年健康雄性SD大鼠150只,随机选出100只建立匹罗卡品慢性癫痫模型,然后将达到癫痫持续状态(Status epilepticus,SE)的实验大鼠随机分为模型(Pilo)组和经皮三叉神经电刺激(TNS)组;正常对照(Control)组给予同剂量的生理盐水代替匹罗卡品腹腔注射,随后Control组和Pilo组均给予为期一个月的经皮三叉神经假性电刺激、TNS组给予为期一个月的真性电刺激。各组大鼠均于经皮三叉神经电刺激结束后24h、72h、7d、14d、28d取材,通过免疫荧光双标和Western blot方法,分析海马和皮层内VGLUT1和VGAT的表达情况。所得数据以均数±标准差（x±s)表示,组间均数比较采用单因素方差(One-way ANOVA)分析,以P<0.05为差异有统计学意义,P<0.01为差异有显著统计学意义。
　　结果：
　　1.VGLUT1在海马和皮层内的表达
　　TNS组和Pilo组大鼠海马、皮层内VGLUT1的表达较Control组均明显增加,总体上均呈先升高后下降的趋势,约在72h左右达到高峰。在24h时,TNS组大鼠海马和皮层内VGLUT1的表达均明显高于Pilo组(P<0.01),而在以后各个时间点均低于Pilo组(P<0.01,P<0.05);TNS组大鼠海马内VGLUT1的表达量在28d时、皮层内在14d和28d时与Control组相比差异无统计学意义(P>0.05),但与Pilo组相比差异均有统计学意义(P<0.05)。
　　2.VGAT在海马和皮层内的表达
　　TNS组和Pilo组大鼠海马、皮层内VGAT的表达较Control组均明显增加,在72h之前 VGAT的表达量逐渐增加,约在72h左右达到高峰,随后开始下降。在72h时,TNS组大鼠海马和皮层内VGAT的表达量均明显低于Pilo组(P<0.01),而在24h、7d、14d、28d时均明显高于Pilo组(P<0.01,P<0.05)。在28d时,Pilo组大鼠海马和皮层内 VGAT的表达量与 Control组相比差异无统计学意义(P>0.05)、但与TNS组相比差异仍有统计学意义(P<0.05)。
　　结论：
　　在匹罗卡品诱导的慢性癫痫大鼠模型形成过程中,予以经皮三叉神经慢性电刺激处理减弱了脑的兴奋性机制、增强了其内源性抑制性机制,从而使脑的兴奋易感性降低;这一作用机制可能与脑内囊泡型谷氨酸转运体-1先增多后减少、囊泡型γ-氨基丁酸转运体明显增多有关,这可能是三叉神经电刺激减少癫痫发作的机制之一。

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英文摘要

1 引言

2 材料和方法

2.1 材料

2.2 实验方法

3 结果

3.1 TNS使慢性癫痫大鼠海马和皮层内VGLUT1的表达减少

3.2 TNS使慢性癫痫大鼠海马和皮层内VGAT的表达增多

4讨论

5结论

参考文献

附录

致谢

综述