流式细胞术检测急性髓细胞白血病免疫表型及其临床意义

摘要

背景:急性髓细胞白血病(AML),也称急性非淋巴细胞白血病(ANLL),是一种血细胞的髓线癌,其特征是快速增殖的异常白血病细胞累积影响正常血细胞的生成。AML是成人急性白血病中最常发生的类型。伴随人口老龄化的发展,AML的患病率也逐渐上升。分化的抗原决定簇(CD),在细胞的免疫表型检测中充当鉴定和研究的靶目标。CD分子作为免疫分型的表面标志物,在细胞表面的表达类型和水平可作为细胞的身份证明。AML细胞表面存在有特定种类的CD分子表达。多参数流式细胞术(MFC)对急性髓细胞白血病的检测有重要意义。因此,通过流式细胞术(FCM)检测AML细胞表面的CD分子的表达,可为AML的诊断及鉴别诊断提供重要的实验诊断依据。
　　目的:应用多参数流式细胞学技术检测急性髓细胞白血病细胞表面CD分子的表达水平,揭示AML中CD分子的表达规律,筛选出诊断AML的CD分子组合,为靶向治疗提供目标CD分子,为临床个体化治疗累积分子机制研究资料。
　　方法:应用MFC检测54例急性髓细胞白血病患者,以CD45/SSC设门分析,应用约20种单克隆抗体对 CD45弱表达的细胞群进行免疫分型分析:cyt-MPO/CD117/CD33/CD13/CD15/CD11c/CD14/CD11b/cyt-CD79α/CD19/CD10/cyt-CD3/CD2/CD7/CD34/CD38/HLA-DR/CD123/CD64/CD56.
　　结果:
　　1、50例急性髓细胞白血病患者流式细胞术检测各表型阳性率(表达>20％为阳性)为 cyt-MPO:80%、CD117:88%、CD33:92%、CD13:78%、CD15:64%、CD11b:32%、CD11c:46%、CD14:0、cyt-CD79α:2%、CD19:6%、CD10:16%、cyt-CD3:0、CD2:2%、CD7:24%、 CD34:58%、CD38:82%、HLA-DR:72%、CD123:52%、CD64:38%、CD56:24%。
　　2、4例急性髓细胞白血病患者CD45/SSC散点图异常表达两群细胞(P3和P5):P3群为髓系原始或幼稚细胞,P5群为幼稚或成熟单核细胞。
　　3、以阳性细胞比例60%作为阈值,将抗原阳性表达患者分为两组进行比较,结果显示,CD33、Cyt-MPO、CD64、CD123在这50例AML患者中的阳性细胞比例明显高于其他抗原(P<0.05);CD14、CD56、CD11b、CD11c在这50例AML患者中阳性细胞比例低于前述抗原。
　　4、以阳性细胞比例60%作为阈值,AML的CD33与CD15表达有差异,具有统计学意义(χ2=16.4>χ20.05,1,P<0.05);CD33与 CD64表达有差异性,具有统计学意义(χ2=14.06>χ20.05,1,P<0.05);CD15与CD64表达无统计学意义(χ2=2.5<χ20.05,1,P>0.05);CD33与cyt-MPO表达无统计学意义(χ2=o.21<χ20.05,1,P>0.05)。
　　结论:急性髓细胞白血病高表达CD117、cyt-MPO、CD33、CD15,低表达cyt-CD79α、CD19、cyt-CD3、CD2、CD14;CD45/SSC设门是较好的分析方法,能够精确地对幼稚细胞进行免疫表型分析;AML细胞表面的抗原表达强度有差异性:CD33、cyt-MPO、CD13、CD117呈高表达,且稳定性较其他CD分子高;CD分子在AML细胞上的阳性表达有差异性,或可为分子靶向治疗提供有用的信息和线索。

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1．前言

2．材料与方法

2.1 实验材料

2.2 流式细胞仪检测和数据的获得

3.结果

3.1 CD分子表达的流式细胞检测结果

3.2 50例AML患者20种CD抗原表达

3.3病例45号、51号、52号、53号的单独实验结果

3.4 CD分子在AML中表达结果

3.5 阳性表达百分比均值高的四种CD分子在AML中表达结果

4．讨论

5．结论

参考文献

附录

致谢

综述

参考文献