Determinación de perfiles inmunofenotípicos por citometría de flujo de leucemia linfoblástica aguda en niños y su valor en la detección de enfermedad mínima residual / Determination of immunoprofiles using flow cytometry in childhood acute lymphoblastic leukemia and its value regarding minimal residual disease detection

摘要

La Citometría de Flujo (CF) es una herramienta útil en diagnóstico y seguimiento de Leucemia Linfoblástica Aguda (LLA) en niños y los niveles de Enfermedad Mínima Residual (EMR) correlacionan con aparición de eventos adversos. Se realizó un estudio retrospectivo en los niños atendidos entre 2005-2009 en la Fundación HOMI Hospital La Misericordia, con diagnóstico por CF de LLA en la Fundación Santa Fe de Bogotá, tratando de identificar los perfiles inmunofenotípicos de la enfermedad y su utilidad en la detección de Enfermedad Mínima Residual (EMR). Se identificó preponderancia de LLA prepreB, sobre otros diagnósticos. La alteración fenotípica más reconocida fue la infraexpresión de CD45. Se estableció un perfil inmunofenotípico relacionado con recaída hematológica (expresión aberrante de CD33 y ausencia de CD34 y CD38) y se calculó su rendimiento operativo como posible prueba pronóstica (Valor Predictivo Negativo ~90%). Se evidenció la utilidad en detección de EMR del estudio de inmunofenotipo por CF alcanzando niveles de discriminación del orden de 10-4 y 10-5; hay correlación estadísticamente significativa entre valores de blastos mayores que 10-2 (1%) y recaída y se observó que ningún caso con blastos menores a 10-4 (0,01%) recayó. La concordancia y reproducibilidad de la metodología fue probada y alcanzó valores satisfactorios (índice de kappa moderado). Se reconoció que el estudio de inmunofenotipo puede ser una herramienta no sólo de importancia diagnóstica sino también pronóstica; sin embargo, futuros estudios con seguimiento clínico se requieren para validar estos resultados. / Abstract. Flow cytometry (FC) is a useful tool for diagnosis and follow-up of children with Acute Lymphoblastic Leukemia (ALL) and Minimal Residual Disease (MRD) levels are related to occurrence of adverse events. A retrospective study was performed on children treated during 5 years (2005-2009) at the Fundacion HOMI Hospital La Misericordia, diagnosed by FC with ALL at the Fundacion Santa Fe de Bogota, looking for disease immunoprofiles and their utility in order to detect Minimal Residual Disease (MRD). PrepreB ALL predominance was identified. CD45 infraexpression was the most remarkable phenotypic alteration. An immunoprofile related to hematologic relapse was established (Aberrant expression of CD33 and lack of expression of CD34 and CD38) and its operative performance as possible diagnostic tool was calculated (Negative Predictive Value ~90%). The FC-immunophenotype utility on MRD detection was evidenced reaching discrimination levels around 10-4 and 10-5; there was statistical correlation among blast levels above 10-2 (1%) and relapse and no relapses were detected with blast levels below 10-4 (0,01%). Concordance and reproducibility of methods was challenged and satisfactory results were obtained (kappa index moderate). We realized that immunoprofile studies could be a useful diagnostic and prognostic tool; however, further studies with clinical follow-up are required in order to validate these results.