妊娠期小鼠肝脏脂质代谢特点以及高果糖饮食对其的影响

摘要

目的：探讨妊娠晚期小鼠肝脏脂质代谢变化特点以及妊娠对孕鼠肝脏脂肪酸合成、转运和氧化相关基因表达和相应核受体的影响；探讨妊娠期高果糖饮食对孕鼠肝脏脂质代谢的影响及其机制。
　　方法：研究一：为观察妊娠晚期小鼠肝脏脂质代谢变化，将小鼠分为孕鼠及非孕鼠两组，自由进食标准饲料，禁食9小时后于孕第17天(GD17)取材，检测两组小鼠空腹血糖值，血清及肝脏甘油三酯（TG）、胆固醇（TCH）、高密度脂蛋白（HDL）、极低密度脂蛋白（VLDL）含量，用油红O染色法检测小鼠肝脏组织脂质沉积情况；为进一步了解妊娠对肝脏脂肪酸合成、转运和氧化的影响，使用qPCR技术及Western bloting技术检测肝脏脂肪酸合成、转运及氧化相关基因表达和核受体。研究二：为观察高果糖饮食对妊娠晚期小鼠肝脏脂质代谢的影响，将小鼠分为果糖孕鼠(FP)、普通孕鼠(CP)两组，分别饮用果糖水溶液及普通自来水，喂养至受孕第18天（GD18）后剖杀，检测血糖、血清甘油三酯（TG）、胆固醇（TCH）及肝脏甘油三酯（TG）、胆固醇（TCH）、高密度脂蛋白（HDL）、极低密度脂蛋白（VLDL）含量，制备冰冻切片用于油红 O染色检测小鼠肝脏组织脂质沉积情况；为进一步了解高果糖饮食对妊娠期小鼠肝脏脂肪酸合成、转运和氧化的影响，使用qPCR技术及Western bloting技术检测肝脏脂肪酸合成、转运及氧化相关基因表达和核受体。
　　结果：研究一：与非孕鼠相比，孕鼠血清TG水平明显升高（1.04±0.38mmol/l，2.30±0.84mmol/l；P＜0.01），VLDL水平显著上升（0.38±0.14mmol/l，0.85±0.31 mmol/l；P＜0.01）。提取两组小鼠肝脏脂质进行检测，结果显示孕鼠肝脏TG水平为156.67±27.06mmol/l，VLDL水平为6.77±1.00 mmol/l，非孕鼠血清TG水平为108.31±50.20mmol/l，VLDL水平为4.98±1.86mmol/l，两组相比，孕鼠肝脏TG及VLDL水平均显著上升，差异有统计学意义。油红O染色显示孕鼠肝脏脂质沉积明显。qPCR及Western bloting结果显示，妊娠晚期小鼠肝脏孕烷X受体（PXR）核蛋白水平显著上升，其靶基因肝脏脂肪酸转位酶（cd36） mRNA水平显著上调；妊娠晚期小鼠肝脏核蛋白固醇调节元件结合蛋白-1c（SREBP-1c）激活，上调靶基因肝脏脂肪酸合成酶（fas）和乙酰辅酶A羧化酶（acc）等mRNA水平；此外，肝脏核蛋白过氧化物酶体增殖物激活受体α（PPARα）受到明显抑制，其靶基因肝脏肉碱棕榈酰转移酶1α（cpt1α）、细胞色素P450酶（cyp）4A10和4A14 mRNA水平均下调。研究二：与普通孕鼠相比，果糖孕鼠血糖水平变化差异无统计学意义（1.99±0.95mmol/l，2.21±0.77mmol/l），血清TG水平有上升趋势（2.31±0.52mmol/l，2.75±1.10mmol/l）,TCH水平无明显变化（2.07±0.43mmol/l，1.99±0.48 mmol/l）。提取两组小鼠肝脏脂质进行检测，结果显示果糖孕鼠肝脏TG水平为100.40±19.41mmol/l，VLDL水平为1.88±0.31mmol/l，普通孕鼠血清TG水平为72.25±12.83mmol/l，VLDL水平为1.47±0.03mmol/l，两组相比，果糖孕鼠肝脏TG及VLDL水平均上升，其中TG明显升高，差异有统计学意义。油红染色显示孕鼠肝脏出现明显脂质沉积。 qPCR及Western bloting结果显示，SREBP-1c的核蛋白水平显著上升，其靶基因肝脏脂肪酸合成酶（fas）和乙酰辅酶A羧化酶（acc）水平均有上升趋势，但差异无统计学意义。
　　结论：研究一：妊娠可能通过激活PXR上调肝细胞脂肪酸摄取关键酶、激活SREBP-1c上调从头合成脂肪酸关键酶、以及抑制PPARα下调肝脏脂肪酸氧化关键酶，引起妊娠晚期肝脏脂质合成增加和脂质沉积。研究二：高果糖饮食可加重孕鼠肝脏TG沉积，可能与肝脏脂质合成相关转录因子SREBP-1c激活有关。

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前言

研究一妊娠对肝脏脂质代谢相关基因表达和核受体的影响

1 引言

2 材料与方法

3 结果

4 讨论

研究二高果糖饮食对妊娠期小鼠肝脏脂质代谢的影响

1 引言

2 材料与方法

3结果

4 讨论

创新之处

局限之处

结论

参考文献

附录

致谢

综述: 妊娠期脂质代谢