木蹄层孔菌乙醇提取物(EEF)的抗肿瘤活性及其作用机理的初步研究

摘要

本文研究了木蹄层孔菌乙醇提取物(EEF)的抗肿瘤活性及其可能的作用机理。通过建立昆明鼠S180肉瘤模型，探讨了EEF对肿瘤生长、荷瘤鼠生存天数、荷瘤鼠免疫功能及肿瘤凋亡相关基因bax、bcl-2表达的影响；用试剂盒测定EEF对正常鼠几个主要器官MDA含量，SOD、GSH-PX活力的影响； MTT法测定了EEF对体外培养的Hela、S180细胞及正常脾细胞生长的影响；利用流式细胞仪检测EEF对S180细胞周期及凋亡率的影响；通过血清药理学方法观察EEF体外对S180细胞生长及脾细胞增值的影响。
　　研究结果表明：(1)100mg/kg.d、250mg/kg.d、500mg/kg.d三个剂量组均能显著抑制肿瘤生长、延长荷瘤鼠的生存天数；且能全面提高荷瘤鼠的非特异型免疫、细胞免疫和体液免疫；并能促进bax基因表达、抑制bcl-2基因表达。(2)250mg/kg.d、500mg/kg.d EEF能显著降低正常鼠肝脏、肾脏MDA含量；100mg/kg.d EEF能显著提高肝脏、肾脏SOD活力，250mg/kg.d EEF组能明显提高肝脏GSH-PX活力。(3)31.25~500μg/ml EEF均能抑制Hela、S180细胞的生长；125μg/mlEEF对正常脾细胞生长有明显的促进作用。(4)100μg/ml、400μg/ml EEF使S180细胞凋亡率显著增加；并能明显提高G0/G1期细胞数，降低S期、G2/M期细胞数。(5)含药血清能显著抑制S180细胞生长，促进脾细胞增值。
　　本实验研究结果显示，EEF对S180肉瘤有较强的抗肿瘤活性。能全面提高荷瘤鼠的免疫功能，提高正常鼠抗氧化能力、对肿瘤细胞的强直接杀伤作用，促进肿瘤细胞凋亡、阻滞细胞周期、抑制其分裂增殖是其可能的抗肿瘤作用机理。

目录

答辩

木蹄层孔菌子实体

前言

第一章 中草药抗肿瘤机制研究进展

1.直接的细胞毒性

2.诱导癌细胞分化

3.抗癌侵袭、抗转移作用

4.改善免疫系统

5.阻止信息传递

6.逆转肿瘤的多药耐药性

7.抑制端粒酶(telomerase,TLMA)活性

8.作用于细胞周期和细胞凋亡的某环节

9.癌化学预防作用

10.抗肿瘤药增效剂

11.结语

第二章 EEF的体内抗肿瘤活性及对荷瘤鼠生存天数的影响

1.实验材料

2.实验方法

3.实验结果

4.讨论

第三章 EEF的癌化学预防作用

1.实验材料

2.实验方法

3.实验结果

4.讨论

第四章 EEF对S180荷瘤鼠免疫功能及对肉瘤组织中Bcl-2和Bax蛋白表达的影响

1.实验材料

2.实验方法

3.实验结果

4.讨论

第五章 MTT法检测EEF体外对Hela、S180及正常鼠脾细胞生长的影响

1.实验材料

2.实验方法

3.实验结果

4.讨论

第六章 EEF对S180细胞凋亡率及细胞周期的影响

1.实验材料

2.实验方法

3.实验结果

4.讨论

第七章 EEF体外实验的血清药理学研究

1.实验材料

2.实验方法

3.实验结果

4.讨论

结论

参考文献

图版说明

致谢

附:本人在读期间发表科研论文、获奖情况一览表