新型核酸纳米载体的设计及在肿瘤细胞成像和药物递送中的应用研究

目录

声明

摘要

符号与缩写

1．1癌症的诊断与治疗

1．1．1癌症的诊断

1．1．2癌症的治疗

1．1．3癌症的诊疗一体化

1．2经典的核酸绵l匈单元用于设计纳米载体

1．2．1核酸适配体

1．2．2脱氧核酶

1．2．3分子信标

1．2．4双链探针

1．3金纳米颗粒

1．3．1金纳米颗粒的理化性质

1．3．2金纳米颗粒分布、代谢性质和毒理研究

1．3．3金纳米颗粒在癌症诊疗中的应用研究

1．4核酸纳米载体在癌症诊断和治疗中的研究进展

1．4．1具有荧光特性的核酸纳米探针用于肿瘤细胞成像

1．4．2核酸纳米载体在药物递送中的研究

1．4．3基于核酸纳米载体的癌症诊疗一体化研究

1．5本论文解决的科学问题及研究内容

参考文献

第二章内源性刺激响应核靶向的纳米载体用于细胞内mRNA成像及药物递送

2．1引言

2．2实验部分

2．2．1试剂和仪器

2．2．2凝胶电泳实验

2．2．4金纳米颗粒表面mRS-DS的修饰量考察

2．2．5特异性考察

2．2．6杂交实验

2．2．7细胞系及细胞培养

2．2．8细胞内荧光成像实验

2．2．10细胞摄取

2．2．11阿霉素插入实验

2．2．12细胞存活率考察

2．2．13统计学分析

2．3结果与讨论

2．3．3金纳米颗粒表面mRS-DS的修饰量及AuNP-mRS-DSs的特异性考察

2．3．4 AuNP-mRS-DSS的选择性考察

2．3．5细胞内荧光成像

2．3．6细胞摄取

2．3．7纳米载体的载药量考察

2．3．8细胞存活率考察

2．4结论

参考文献

第三章多功能分子信标修饰的金纳米颗粒作为纳米载体用于活细胞内耐药相关mRNA的协同抑制及原位成像

3．1引言

3．2实验部分

3．2．1试剂和仪器

3．2．2凝胶电泳实验

3．2．3金纳米颗粒(AuNPs)的合成及MBs-AuNP的制备

3．2．4金纳米颗粒表面分子信标的修饰量考察

3．2．5可行性与稳定性实验

3．2．6细胞系及细胞培养

3．2．7细胞内荧光成像

3．2．8 MDR1 mRNA、MRP1 mRNA和BCRP mRNA的相对表达水平分析

3．2．9 Western blotting实验

3．2．10阿霉素插入实验

3．2．11细胞毒性实验

3．2．12统计学分析

3．3结果与讨论

3．3．1 DNA序列设计的可行性验证

3．3．2 MBs-AuNP的表征

3．3．3金纳米颗粒表面分子信标的修饰量考察

3．3．4可行性及稳定性考察

3．3．5细胞内荧光成像

3．3．6 MBs-AuNP对细胞内耐药相关mRNA和蛋白水平的影响

3．3．7纳米载体的载药量考察

3．3．8细胞存活率实验

3．4结论

参考文献

第四章端粒酶特异性的DNAzyme驱动的DNA walker作为纳米载体用于活细胞内端粒酶活性分析及药物递送

4．1引言

4．2实验部分

4．2．1试剂和仪器

4．2．2凝胶电泳实验

4．2．3金纳米颗粒(AuNPs)的制备

4．2．4 tsDNA-AuNP的制备及其表面底物发卡修饰量的考察

4．2．5细胞培养及HeLa细胞提取液的制备

4．2．6 HeLa细胞提取液中端粒蔫活性检测

4．2．7 tsDNA-AuNP的稳定性考察

4．2．8细胞内端粒酶活性的成像分析

4．2．9 TERT mRNA的相对表达水平分析

4．2．10端粒酶抑制剂的筛选

4．2．11阿霉素插入实验

4．3结果与讨论

4．3．1 DNA序列设计的可行性验证

4．3．2 tsDNA-AuNP的表征

4．3．3 tsDNA-AuNP的可行性和稳定性考察

4．3．4行走链与底物发卡修饰比例的考察

4．3．5 tsDNA-AuNP检测性能的考察

4．3．6细胞内端粒酶活性分析的条件优化

4．3．7不同细胞内端粒酶活性分析

4．3．8端粒酶抑制剂的筛选

4．3．9纳米载体的载药量考察

4．4结论

参考文献

5．1结论

5．2展望

致谢

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附录