论文说明
声明
摘要
第1章绪论
1．1鳜鱼的生物学特性和养殖现状
1．1．1鳜鱼的生物学特性
1．1．2鳜鱼的养殖现状
1．2鳜鱼病害的研究进展
1．2．1细菌性疾病
1．2．2病毒性疾病
1．3鳜鱼病害的防治方法
1．3．1抗菌药物防治
1．3．2疫苗防治
1．4嗜水气单胞菌的生物学特性及其对水产养殖生产的危害
1．4．1嗜水气单胞菌的生物学特性
1．4．2嗜水气单胞菌的毒力因子
1．4．3嗜水气单胞菌对水产养殖生产的危害
1．4．4嗜水气单胞菌的检测方法
1．5本论文的研究意义和主要内容
第2章鳜鱼病原嗜水气单胞菌鉴定及致病性研究
2．1材料与方法
2．1．1实验试剂
2．1．2实验仪器
2．1．3实验动物
2．1．4细菌分离
2．1．5分离菌的形态观察
2．1．6分离菌株G3致病性检测
2．1．7组织病理观察
2．1．8生理生化特性检测
2．1．9 16S rRNA和gyrB基因序列测定
2．1．10嗜水气单胞菌的毒力相关基因检验
2．1．11胞外酶与溶血活性检测
2．2实验结果
2．2．1菌株形态特征
2．2．2分离菌株G3的致病性
2．2．3组织病理变化
2．2．4理化特性
2．2．5菌株G3系统发育树构建
2．2．6毒力基因检测结果
2．2．7胞外酶和溶血活性
2．3讨论
第3章嗜水气单胞菌LAMP检测方法的建立
3．1材料与方法
3．1．1实验试剂
3．1．2实验仪器
3．1．3供试菌株
3．1．4菌株DNA的提取
3．1．5 LAMP引物设计与合成
3．1．6 LAMP反应条件的优化
3．1．7 LAMP扩增的特异性检测
3．1．8 LAMP扩增的灵敏性检测
3．1．9 LAMP检测的应用
3．2实验结果
3．2．1 LAMP检测方法的优化体系
3．2．2嗜水气单胞菌LAMP检测的特异性扩增结果
3．2．3嗜水气单胞菌LAMP检测的灵敏度
3．2．4嗜水气单胞菌LAMP检测方法的应用
3．3讨论
第4章鳜鱼感染嗜水气单胞菌后转录组测序分析
4．1材料与方法
4．1．1实验试剂
4．1．2实验仪器
4．1．3实验鳜鱼
4．1．4鳜鱼的感染及取样
4．1．5 RNA的提取及提取质量检测
4．1．6 cDNA文库构建和转录组测序
4．1．8 De novo拼接和unigene功能注释
4．1．9差异表达基因和富集分析
4．1．10 qRT-PCR验证差异基因表达
4．2实验结果
4．2．1测序与De novo拼接结果
4．2．2 Unigene功能注释
4．2．3差异表达基因及其聚类分析
4．2．4差异表达基因GO功能富集
4．2．5差异表达基因KEGG通路富集分析
4．2．6测序结果验证
4．3讨论
第5章鳜鱼感染嗜水气单胞菌后6种免疫相关基因表达的变化分析
5．1材料与方法
5．1．1实验试剂
5．1．2实验仪器
5．1．3实验鳜鱼
5．1．4鳜鱼的感染及取样
5．1．5 RNA的提取及cDNA的合成
5．1．6 qRT-PCR所用引物的设计与验证
5．1．7 qRT-PCR检测
5．1．8数据处理及分析
5．2实验结果
5．2．1 qRT-PCR所用引物的获得
5．2．3 TCR-α在鳃、脾脏和头肾中的表达变化
5．2．4 TNF-α在鳃、脾脏和头肾中的表达变化
5．2．5 CC chemokine 3在鳃、脾脏和头肾中的表达变化
5．2．6IL-8在鳃、脾脏和头肾中的表达变化
5．2．7 Hepcidin在鳃、脾脏和头肾中的表达变化
5．3讨论
全文结论
参考文献
攻读学位期间取得的研究成果
致谢
扬州大学;
