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摘要
中英文缩略词对照表
第1章前言
第2章主要实验材料
1试剂耗材
2实验仪器及设备
3常用配方
1．1细胞系
1．2细胞消化与传代
1．3细胞冻存
1．4细胞复苏
2肝癌组织芯片
3免疫组织化学染色及分析
4构建RNA干扰MOB2表达的慢病毒载体
4．1 pLent-U6-Puro载体的双酶切及纯化
4．2引物退火
4．3 DNA连接
4．4质粒转化
4．5挑克隆、摇菌
4．6质粒的提取、测序鉴定
4．7 DNA电泳
5慢病毒的包装
6慢病毒感染细胞、稳定细胞模型的建立及鉴定
6．1筛选嘌呤霉素的作用浓度
6．2慢病毒感染细胞
7腺病毒感染细胞
8 RT-qPCR
8．1总RNA提取
8．2反转录
8．3 Real time PCR
9 Western blotting实验
9．1提取总蛋白
9．2蛋白定量
9．3 SDS-PAGE及免疫印迹
10 CCK-8细胞活力检测实验、EdU细胞增殖实验和克隆形成实验
10．1 CCK-8细胞活力实验
10．2 EdU细胞增殖实验
10．3克隆形成实验
11细胞划痕实验和Transwell细胞迁移实验
11．1细胞划痕实验
11．2 Transwell细胞迁移实验
12自噬流实验
13 RNA-seq检测及分析
14统计学分析
第4章实验结果
1 MOB2在肝癌组织以及不同转移能力的肝癌细胞中的差异表达
2成功建立不同转移能力肝癌细胞MOB2干扰表达的细胞模型
3 MOB2干扰表达对肝癌细胞的细胞活力、细胞增殖和细胞克隆形成的影响
4 MOB2干扰表达的肝癌细胞中转录组学变化的检测结果
5 MOB2干扰表达对肝癌细胞迁移的影响
6 MOB2干扰表达对肝癌细胞自噬的影响
7 MOB2干扰表达对肝癌细胞中NDR1／2和YAP表达的影响
8 MOB2干扰表达通过NDR1／2-YAP通路影响肝癌细胞的迁移与细胞自噬
第5章讨论
第6章结论
参考文献
文献综述 NDR1／2在哺乳动物细胞中的功能研究进展
攻读学位期间取得的研究成果
致谢
扬州大学;
