声明
摘要
缩略词表
前言
文献综述
1肌内脂肪细胞概述
1．1肌内脂肪细胞的特性
1．2脂肪细胞分化相关基因
2 p38 MAPK和p44／42 MAPK信号通路概述
2．1 p38 MAPK和p44／42 MAPK信号通路在脂肪分化和代谢中的作用
3 ZBTB16相关研究进展
3．2 ZBTB16基因的调控
3．3 ZBTB16基因的功能
3．4 ZBTB16基因在脂肪细胞分化中的作用
4脂肪细胞棕色化
4．1棕色脂肪细胞
4．2棕色化相关基因
研究目的及内容
第一章牛肌内前体脂肪细胞的分离培养及分化相关基因的表达规律研究
1材料与设备
1．1试验动物
1．2主要试剂及配方
1．3试验仪器及器材
2试验方法
2．1前体脂肪细胞的体外培养
2．2生长曲线绘制
2．3细胞诱导分化
2．4油红O染色及细胞内脂质含量测定
2．5 RNA提取、纯化及基因表达检测
2．6数据分析
3结果
3．1 牛前体脂肪细胞原代培养和传代培养的形态学观察
3．2 CCK-8比色法绘制牛前体脂肪细胞的生长曲线
3．3细胞内脂肪含量测定
3．4牛前体脂肪细胞分化过程中标志基因表达情况
4讨论
本章小结
第二章ZBTB16过表达对牛肌内前体脂肪细胞增殖与分化的影响
1．2主要试剂及配方
1．3试验仪器及器材
2试验方法
2．1 牛肌内前体脂肪细胞的体外培养
2．3 CCK-8检测细胞增殖活性
2．4牛肌内前体脂肪细胞的诱导分化
2．5 油红O染色及细胞内脂质含量测定
2．6 GPDH活性测定
2．7 RNA的提取、纯化及基因表达检测
2．8 Western blot
2．9数据分析
3结果与分析
3．1 Ad-ZBTB16过表达载体的检测与验证
3．2 ZBTB16过表达对牛肌内前体脂肪细胞增殖的影响
3．3 ZBTB16过表达对牛肌内前体脂肪细胞分化的影响
3．4牛肌内前体脂肪细胞分化过程中ZBTB16表达水平
3．5 ZBTB16过表达对脂肪细胞分化关键基因表达的影晌
3．6 ZBTB16过表达对脂肪细胞分化关键基因的蛋白表达水平的影响
4讨论
本章小结
第三章ZBTB16过表达诱导牛肌内前体脂肪细胞的棕色化
1．3试验仪器及器材
2试验方法
2．1 牛肌内前体脂肪细胞的体外培养
2．2腺病毒载体转染
2．3细胞的诱导分化
2．4 RT-qPCR检测棕色脂肪相关标志基因mRNA表达量
2．5 Western Blot检测棕色化过程中标志蛋白UCP1及分化相关信号通路蛋白磷酸化水平
2．6线粒体免疫荧光分析
2．7数据分析
3结果与分析
3．2 ZBTB16过表达对牛肌内脂肪细胞中棕色脂肪标志基因UCP1基因表达的影响
3．3 ZBTB16过表达对牛肌内脂肪细胞中棕色化相关基因表达的影响
3．4免疫荧光染色分析ZBTB16过表达对牛肌内脂肪细胞中线粒体的影响
3．5 ZBTB16过表达对牛肌内脂肪细胞中分化相关信号通路的影响
4讨论
本章小结
第四章ZBTB16过表达对牛皮下前体脂肪细胞分化和棕色化的影响
1材料和设备
1．1试验动物
1．2主要试剂及配方
1．3试验仪器及器材
2试验方法
2．1 牛皮下前体脂肪细胞的体外培养
2．2腺病毒载体转染
2．3细胞的诱导分化
2．4 RT-qPCR检测脂肪分化及棕色化相关基因mRNA表达量
2．5 油红O染色及细胞内脂质含量测定
2．6线粒体免疫荧光分析
2．7数据分析
3结果与分析
3．1 ZBTB16过表达对牛皮下前体脂肪细胞分化的影响
3．2 ZBTB16过表达对牛皮下脂肪细胞中线粒体基因ND1表达的影响
3．3 免疫荧光染色分析ZBTB16过表达对牛皮下前体脂肪细胞中线粒体的影响
3．4 ZBTB16过表达对牛皮下脂肪细胞中棕色化相关基因表达的影响
4讨论
本章小结
全文总结
参考文献
致谢
攻读硕士学位期间发表论文
南京农业大学;
