不同CO2和N素水平对转Bt水稻外源基因表达和抗虫效果的影响

目录

论文说明

声明

摘要

第一章文献综述

1．2转Bt水稻的应用

1．3转Bt水稻的发展

1．4 Bt毒素作用机制

1．5昆虫Bt抗性的产生

2大气CO2浓度升高对转Bt植物影响

2．2 CO2浓度对转Bt作物外源毒素表达量的影响

2．3 CO2浓度对转Bt作物抗虫性的影响

3研究目的与意义

4技术路线图

第二章CO2倍增对不同N素水平下转Bt水稻的外源Bt毒素及基因表达的影响

1材料方法

1．1水稻及生长条件

1．2主要试剂耗材及仪器设备

1．3转Bt水稻生物量的测定

1．5 RNA制备及反转录

1．6实时PCR分析

1．7转Bt水稻叶片DNA提取及纯化

1．8数据分析

2结果分析

2．1植物地上及地下生物量

2．2叶片Bt毒素及可溶性蛋白含量

2．3转Bt水稻叶片Bt基因表达量

2．4转Bt基因水稻叶片Bt转基因甲基化状况

3讨论

第三章CO2浓度倍增对转Bt水稻靶标抗虫性的影响

1材料方法

1．1试验CO2浓度设置

1．2供试水稻与虫源

1．3主要试剂及仪器设备

1．4二化螟中肠蛋白酶及氨肽酶活性测定

1．5二化螟氨肽酶基因表达量测定

1．6 APN基因选择及引物设计

1．7 PCR反应体系及反应程序

1．8 SYBR Green实时荧光定量PCR

1．9统计分析

2结果与分析

2．1二化螟中肠蛋白酶活性变化

2．2二化螟中肠类胰蛋白酶活性变化

2．3二化螟中肠类胰凝乳蛋白酶活性变化

2．4二化螟中肠氨肽酶N活性变化

2．5二化螟中肠APNs基因表达量分析

3讨论

第四章CO2浓度倍增对转Bt水稻非靶标害虫褐飞虱的影响

1材料与方法

1．3褐飞虱生长发育和繁殖测定

1．4褐飞虱若虫刺吸取食行为试验

1．5数据处理

2结果分析

2．2 CO2浓度倍增对褐飞虱成虫体重、寿命和繁殖力的影响

2．3 CO2浓度倍增对褐飞虱成虫翅型分化和性比的影响

2．4 CO2浓度倍增对褐飞虱若虫取食行为的影响

3结论与讨论

第五章全文总结

1结论

2创新点

3不足与展望

参考文献

致谢

攻读硕士期间取得的学术成果